

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、口蹄疫(Foot-and-mouthdisease,F(xiàn)MD)是一種高度接觸性傳染病,對(duì)國(guó)際貿(mào)易具有深遠(yuǎn)的影響,被OIE列為A類(lèi)傳染病之首。FMD控制和消滅策略包括疫苗免疫和屠宰可疑畜群。在免疫接種的群體,大多數(shù)動(dòng)物血清FMDV結(jié)構(gòu)蛋白抗體均為陽(yáng)性,故一些基于結(jié)構(gòu)蛋白的診斷方法很難確定感染口蹄疫病毒與否。只有將感染動(dòng)物和隱性帶毒動(dòng)物與疫苗免疫動(dòng)物加以區(qū)分才能為FMD的控制和消滅提供科學(xué)的依據(jù)。從已經(jīng)發(fā)表的鑒別感染口蹄疫病毒動(dòng)物和免疫動(dòng)物的
2、結(jié)果來(lái)看,3ABC和3AB是比較公認(rèn)的良好檢測(cè)用抗原,但也有一些在牛上進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)顯示,少數(shù)的免疫動(dòng)物體內(nèi)存在3A抗體,這有可能是在疫苗制備過(guò)程中仍有微量3A蛋白殘留,也有可能是一些交叉抗原的抗體所致??傊?,這會(huì)影響基于3ABC或3AB的檢測(cè)方法的特異性。我們利用篩選到的位于3ABC蛋白3B多肽上的保守的、具有強(qiáng)結(jié)合活性的F5表位建立特異性免疫檢測(cè)方法可能是克服類(lèi)似問(wèn)題的一種途徑。 用重組DNA技術(shù),以pM18T-3ABC質(zhì)粒為模
3、板將F5表位(141-190位氨基酸)基因用上游引物1和下游引物擴(kuò)增得到了目的大小的基因片段(150bp左右),將F5片段用BglⅡ和HindⅢ雙酶切,與經(jīng)BamHI和HindⅢ雙酶切的pET-28a(+)片段連接,轉(zhuǎn)化TG1,依次將6個(gè)含F(xiàn)5片段串聯(lián),表達(dá)質(zhì)粒命名為pET-28a-F5(+6),然后在大腸桿菌中進(jìn)行了表達(dá),將表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDS-PAGE和蛋白質(zhì)斑點(diǎn)ELISA。結(jié)果表明F5(+6)基因主要以可溶形式高效表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物具有
4、免疫原性。以純化的表達(dá)產(chǎn)物為抗原建立了間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)F5(+6)-ELISA。用307份陰性血清和30份陽(yáng)性血清等檢測(cè),結(jié)果表明,該檢測(cè)方法的特異性為96%,初步的敏感性(preliminarysensitivity)為100%。證明F5(+6)-ELISA方法可用于口蹄疫的鑒別診斷。對(duì)經(jīng)2次免疫的512份豬血清用F5(+6)-ELISA檢測(cè),同時(shí)作IHA檢測(cè),結(jié)果雙陽(yáng)性的為2.0%。 用NS-3AB作為識(shí)別抗原建立的EL
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 抗A型口蹄疫病毒和O型口蹄疫病毒重組雙價(jià)多肽疫苗研究.pdf
- 口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白的分段表達(dá)及免疫試驗(yàn)研究.pdf
- 檢測(cè)口蹄疫病毒單抗ELISA方法的建立及口蹄疫病毒多抗原基因的融合表達(dá).pdf
- 口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2B的離子孔道特性研究.pdf
- 基于口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3AB的ELISA鑒別檢測(cè)方法的研究.pdf
- RNAi抑制口蹄疫病毒復(fù)制與感染的相關(guān)研究.pdf
- 口蹄疫病毒在豬體內(nèi)的定位研究.pdf
- 口蹄疫病毒3A蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)及功能分析.pdf
- IL-10對(duì)口蹄疫病毒感染后免疫調(diào)控機(jī)理影響的研究.pdf
- GEM技術(shù)純化濃縮口蹄疫病毒抗原研究.pdf
- snt 1181.1-2003 口蹄疫病毒感染抗體檢測(cè)方法 瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)
- 重組口蹄疫病毒VP1-VP4蛋白誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答研究.pdf
- 利用轉(zhuǎn)基因胡蘿卜表達(dá)口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1.pdf
- 抗A型口蹄疫病毒單克隆抗體的制備.pdf
- 口蹄疫病毒感染PK-15細(xì)胞后細(xì)胞基因表達(dá)譜變化的分析.pdf
- C型口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白的原核表達(dá)及免疫原性分析.pdf
- 口蹄疫病毒受體豬源整聯(lián)蛋白基因的克隆及表達(dá).pdf
- 口蹄疫病毒干擾RNA轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建.pdf
- 抗口蹄疫病毒轉(zhuǎn)基因綿羊重構(gòu)胚胎的制備.pdf
- O型口蹄疫病毒單克隆抗體的研制.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論