光信號在微生物區(qū)分與藥物抗菌活性研究中的應用.pdf

1、眾所周知，通過物質對光的吸收、散射和發(fā)熒光、發(fā)磷光等現(xiàn)象，可以對物質進行定性和定量測定。本文主要利用從熒光分光光度計上獲得的光散射信號對微生物進行了區(qū)分，利用流式細胞儀上獲得的熒光信號研究了改性頭孢噻肟和細胞型朊蛋白(PrPc)的抑菌活性。具體研究內容如下： 1、利用光散射信號對微生物進行區(qū)分 光的散射信號發(fā)生在光與粒子的相互作用過程中，它與散射粒子的大小、形態(tài)、折光指數(shù)等方面有關。本文在配有偏振片的普通熒光分光光度計上

2、保持激發(fā)和發(fā)射波長相等，通過同時掃描激發(fā)和發(fā)射單色器獲得的光散射光譜對大腸桿菌Escherichia coli(E．coli)的2種不同菌株：Ecoli(DH5a)，Ecoli(BL-21)進行了探索性研究。結果表明，偏振同步光散射可以區(qū)分、表征這西種微生物，該方法簡便、靈敏、快速。 2、利用流式細胞儀上獲得的熒光信號研究藥物的抑菌活性 流式細胞儀既可以檢測樣品的散射信號，也可以檢測樣品的熒光信號。本文利用流式細胞儀上獲

3、得的熒光信號對藥物的抑菌活性進行了研究。 (1)在頭孢噻肟(Cefotaxime Sodium)7位側鏈的氨基上通過戊二醛的偶聯(lián)作用修飾上殼聚糖，將修飾及朱修飾的頭孢噻肟分別與金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.aureus)孵育后，用碘化丙錠(Propidium Iodide，PI)染色，然后利用流式細胞儀檢測樣品熒光強度的變化。結果表明，頭孢噻肟改性后對金黃色葡萄球菌的抑菌活性增強了。本文同時研究

4、了不同溫度對頭孢噻肟改性后抑菌活性的影響，發(fā)現(xiàn)在60℃下所得的改性頭孢噻肟的抑菌活性最強。另外也研究了改性頭孢噻肟在不同濃度和不同作用時間下與S.aureus的作用情況，這將為臨床給藥提供一定依據(jù)。 (2)利用流式細胞儀探索了細胞型朊蛋白(PrPc)對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S aureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis，B．subtilis)、巨大芽孢桿菌(Bacill

5、us megaterium,B，megaterium)、蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis,B．thuringiensis)、大腸桿菌[Escherichia coli(BL-21)，E．coli(BL-21)]這五種隨機所選細菌的抑菌活性，結果表明，細胞型朊蛋白(PrPc)對S.aureus和B．subtilis具有明顯的抑制活性，而對B．megaterium，B．thuringiensis和E．coli(B