微生物發(fā)酵飼料在刺參養(yǎng)殖中的應(yīng)用.pdf

1、本文研究發(fā)酵海帶對刺參的飼養(yǎng)效果，通過分析發(fā)酵海帶蛋白含量的變化、發(fā)酵海帶作為刺參飼料和飼料中添加殼寡糖對刺參生存與生長、消化酶活性及消化道菌群結(jié)構(gòu)、刺參非特異性免疫機(jī)能等方面的影響來評價(jià)發(fā)酵海帶作為刺參飼料的營養(yǎng)價(jià)值與開發(fā)前景，除此之外，文中還就發(fā)酵海帶的條件優(yōu)化、海洋酵母的篩選鑒定等內(nèi)容進(jìn)行闡述，具體研究結(jié)果如下:
　　1、人為添加枯草芽孢桿菌進(jìn)行海帶發(fā)酵，其適宜發(fā)酵溫度為30℃、適宜發(fā)酵時(shí)間為96 h，接種劑量為12％(w/

2、v，108 cfu/mL)，發(fā)酵后海帶的粗蛋白含量為14.65％，相對提高15.17％。配合飼料中添加30％的發(fā)酵海帶喂養(yǎng)刺參，在36d飼養(yǎng)時(shí)間內(nèi)能顯著提高刺參特定生長率、血淋巴液溶菌活性、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶活性(ACP)、蛋白酶活性和淀粉酶活性(P＜0.05)，但是對刺參體腔細(xì)胞數(shù)、纖維素酶活性無顯著影響（P＞0.05）。此外，投喂發(fā)酵飼料還可見刺參消化道異養(yǎng)菌總數(shù)、弧菌相對數(shù)量降低、芽孢桿菌相對數(shù)量升高等

3、現(xiàn)象:異養(yǎng)菌總數(shù)由3.23×106 cfu.g-1減少至2.86×106cfu.g-1，弧菌相對數(shù)量由36.68％降低為26.82％，芽孢桿菌由8.92％升至15.01％。
　　2、以黑曲霉發(fā)酵海帶，適宜發(fā)酵溫度為34℃，發(fā)酵時(shí)間120 h，接種劑量10％(w/v，108 cfu/mL)，發(fā)酵后海帶的粗蛋白含量為16.53％，相對提高27.64％。配合飼料中添加30％的發(fā)酵海帶喂養(yǎng)刺參，在36d的試驗(yàn)性養(yǎng)殖時(shí)間內(nèi)能顯著提高刺參特定

4、生長率、血淋巴液溶菌活性、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性（P＜0.05），但是對刺參體腔細(xì)胞數(shù)、纖維素酶活性無顯著影響(P＞0.05)。此外，投喂發(fā)酵飼料使刺參腸道異養(yǎng)菌總數(shù)、弧菌占總菌數(shù)比例低于原有水平。異養(yǎng)菌總數(shù)由3.23×106cfu.g-1減少至2.76×106 cfu.g-1;弧菌相對數(shù)量由36.68％降低為29.12％。
　　3、從自然海水中和刺參腸道中分離、篩選出

5、6株酵母菌，運(yùn)用生理生化和分子生物學(xué)方法對其進(jìn)行鑒定，結(jié)果是:HS-1為漢遜德巴利酵母（Debaryomyces hansenii），HS-2為釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），H-4為膠紅酵母（Rhodotorula mucilaginosa，H-5為雙倒卵形紅冬孢酵母（Rhodosporidium diobovatum），H-10為中國漢納酵母（Hannaellasinensis），H-12為海濱紅酵母(

6、Rhodotorula marina);采用凱氏定氮法測定其粗蛋白含量等指標(biāo)，結(jié)果顯示:HS-1的生物量(g/L)及蛋白質(zhì)含量(w/w)分別為5.95、33.131，HS-2分別為6.22、35.972，H-4分別為4.45、44.424，H-5分別為5.82、50.674，H-10分別為4.65、44.381，H-12為4.35、44.871，其中H-5的粗蛋白含量顯著高于其他菌株(P＜0.05)。選取雙倒卵形紅冬孢酵母發(fā)酵海帶，經(jīng)測

7、定，其粗蛋白含量為14.51％，相對提高11.50％。配合飼料中添加30％的發(fā)酵海帶喂養(yǎng)刺參，在36 d的試驗(yàn)期限內(nèi)刺參特定生長率、體腔液溶菌活性、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性皆有顯著提高(P＜0.05)，但是刺參體腔液中血淋巴細(xì)胞數(shù)量、纖維素酶活性并無顯著變化(P＞0.05)，刺參腸道異養(yǎng)菌總數(shù)及弧菌所占比例則有所下降。異養(yǎng)菌總數(shù)由3.23×106 cfu.g-1減少至2.81×

8、106 cfu.g-1;弧菌相對數(shù)量由36.68％降低為31.04％。
　　4、在刺參基礎(chǔ)飼料中分別添加0.5％、0.75％、1.0％、1.5％商品殼寡糖（青島博智匯力生物科技有限公司，分子量＜3000，純度＞97％）和1.0％自制殼寡糖進(jìn)行刺參喂養(yǎng)試驗(yàn)，結(jié)果顯示:飼料中添加殼寡糖能顯著提高刺參特定生長率、體腔液溶菌活性、總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性、蛋白酶活性和淀粉酶活性(P＜0.05)，但是，對

9、刺參體腔液中的血淋巴細(xì)胞數(shù)量、纖維素酶活性等生理生化指標(biāo)無顯著影響(P＞0.05)，對刺參腸道異養(yǎng)菌、弧菌甚至是枯草芽孢桿菌則有抑制作用，弧菌、枯草芽孢桿菌分別在0.5％和1.0％濃度的培養(yǎng)液中不能繼續(xù)增殖。從上述檢測指標(biāo)中還發(fā)現(xiàn):購自于青島博智匯力生物科技有限公司的殼寡糖在刺參飼料中的添加量達(dá)到0.75％時(shí)使用效果最顯著;飼料中添加自制殼寡糖與商品殼寡糖喂養(yǎng)效果差異不大。
　　綜合上述可見，枯草芽孢桿菌、黑曲霉、海洋酵母發(fā)酵海帶