HSG基因從體外體內(nèi)抑制肝細(xì)胞肝癌生長(zhǎng)的研究.pdf

1、目的：增殖抑制基因(HSG)能夠有效的阻遏細(xì)胞周期和抑制細(xì)胞增殖，同時(shí)在球囊血管成形術(shù)后立即定向局部轉(zhuǎn)染rHSG/Mfn2的措施能夠抑制新生內(nèi)膜的生長(zhǎng)和血管壁的重塑。該實(shí)驗(yàn)主要應(yīng)用腺病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因方式轉(zhuǎn)染HSG，以觀察HSG對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響以及其治療作用。 方法：利用Western Blot以及RT—PCR的方法檢測(cè)肝癌組織以及相應(yīng)癌旁組織中HSG的表達(dá)。體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞系HepG2并轉(zhuǎn)染含有HSG基因的重組腺病毒載體(A

2、dHSG)，采用CCK8檢測(cè)肝癌細(xì)胞活力；利用流式細(xì)胞儀分析HSG對(duì)細(xì)胞周期的影響；應(yīng)用Western Blot方法檢測(cè)HSG對(duì)細(xì)胞周期蛋白激酶抑制劑(cyclin—dependent kinase inhibitor，CDKI)p21、p27及細(xì)胞增殖核抗原(proliferatingcell nuclear antigen，PCNA)的作用。同時(shí)建立間接和直接裸鼠皮下肝癌種植瘤的模型，檢測(cè)HSG對(duì)肝癌的治療作用。 結(jié)果：肝細(xì)

3、胞肝癌患者肝癌組織中HSG的表達(dá)明顯低于相應(yīng)的癌旁組織(p＜0.05)。AdHSG轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的HepG2后，HSG表達(dá)量明顯升高，能明顯抑制細(xì)胞活力；細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期，周期調(diào)控蛋白p21、p27表達(dá)升高，PCNA表達(dá)降低。同時(shí)在裸鼠皮下肝癌模型中注射HSG后可以明顯抑制腫瘤的生長(zhǎng)。 結(jié)論：HSG基因過(guò)表達(dá)可以抑制肝癌的生長(zhǎng)，并可能是通過(guò)參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)發(fā)揮作用。提示HSG在認(rèn)識(shí)和治療包括腫瘤在內(nèi)的細(xì)胞增殖性疾病有重要的啟