白質消融性白質腦病臨床與EIF2B基因突變研究.pdf

1、白質消融性白質腦病(Leukoencephalopathy with vanishing white matter，VWM)又稱兒童共濟失調(diào)伴中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘化不良(childhood ataxia with central nervous systemhypomyelination，CACH)(OMIM 603896)是一種常染色體隱性遺傳的腦白質病，典型的臨床表現(xiàn)為緩慢進展的神經(jīng)系統(tǒng)退行性變，運動倒退重于智力倒退，可伴共濟失調(diào)，痙攣

2、性肢體運動障礙，個別病人可有不同程度的視神經(jīng)萎縮及癲癇。根據(jù)發(fā)病年齡可分為先天型、嬰兒型、早期兒童型、晚期兒童型及成人型共5型。其中最常見的是早期兒童型，也即經(jīng)典型。該病的頭顱核磁(MRI)有區(qū)別于其它白質腦病的特異表現(xiàn)：彌漫對稱的白質異常信號，T1、T2及Flair像上異常白質信號特點接近腦脊液信號，提示這部分大腦白質已經(jīng)發(fā)生了液化，也是其特異性表現(xiàn)。該病是目前人類遺傳性疾病中第一個確定由于mRNA翻譯啟動異常導致的遺傳性疾病。200

3、1～2002年發(fā)現(xiàn)其致病基因是由于編碼真核細胞翻譯啟動因子2B(Eukaryotic translation initiation factor 2B,EIF2B)五個亞單位(EIF2Ba-ε)的相應編碼基因(EIF2B1-5)之一突變所致。根據(jù)收集病例的基因檢測結果，國外認為各基因突變所占比例由大到小依次是EIF2B5、EIF2B4、EIF2B2、EIF2B3和EIF2B1。國外研究發(fā)現(xiàn)該病基因型與表型間無明確相關性，國內(nèi)尚沒有準確的

4、發(fā)病率研究資料，北京大學第一醫(yī)院兒科于2006年報道了國內(nèi)首例VWM患者。 目的：對北京大學第一醫(yī)院兒科1年來收集的11例受試對象依照已報道突變所占比例的大小，依次進行EIF2B1～5基因突變分析，為VWM患者的確診、遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷提供依據(jù)，并為日后的功能研究奠定基礎。 方法：對11例(男7例，女4例)臨床診斷為VWM的患者的臨床表現(xiàn)、影像學特點及實驗室檢查進行綜合分析。在知情同意的前提下采集5ml外周血提取DNA，

5、采用聚合酶鏈反應(PCR)檢測EIF2B1～5基因，運用DNA直接測序的方法進行EIF2B1～5基因突變分析，明確基因突變類型。此部分工作均在北京大學第一醫(yī)院兒科研究室完成(部分前期工作由課題組的其他研究生和老師完成，包括蔚洪恩、王慧芳、姚磊、吳曄等)。 結果： 1.臨床表現(xiàn)：11例患者中有10例出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體征，1例僅有MRI異常，起病年齡1歲4個月到6歲5個月，平均年齡3歲10個月，病前智力運動基本正常，多以運

6、動障礙起病，下肢重于上肢。病情加重前5例有發(fā)熱或上呼吸道感染史，4例有外傷史。4例病程中出現(xiàn)過驚厥史。1例家族史陽性。10例有上運動神經(jīng)元病變體征，5例有小腦性共濟失調(diào)體征。 2.頭顱MRI：MRI共同表現(xiàn)為彌漫對稱性腦室周圍、半卵圓中心長T1長T2信號，可累及皮層下白質，以額葉、頂葉白質為主，F(xiàn)lair像上對稱性白質高信號，部分區(qū)域低信號，或者大部分白質低信號僅存少量殘留高信號，其中4例胼胝體膝部或壓部有異常信號，1例胼胝體變

7、薄。2例腦橋被蓋部或腦干可見點狀長T2信號。6例患者多次復查頭顱MRI，僅1例有進展，其余沒有顯著變化。 3.實驗室檢查：本組常規(guī)實驗室檢查及特殊實驗室檢查，結果正常。 4.基因檢測結果：11例臨床診斷為VWM的患者，根據(jù)國外報道突變概率的大小，依次進行了EIF2B5、EIF2B4、EIF2B2、EIF2B3、EIF2B1的檢測，在9例患者中發(fā)現(xiàn)了基因突變，其中4例患者的突變位于EIF283，其余5例突變均位于EIF285。3例

8、為純合突變，5例為復合雜合突變，1例僅找到一處突變。9例突變患者中共發(fā)現(xiàn)12種突變，其中包括5種沒有報道的錯義突變：c.1126A＞G(p.N376D)，c.1004G＞C(p.C335S)，c.185A＞T(p.D62V)，c.140 G＞A(p.G47E)，c.1037 T＞C(p.I346T)。5種已知的錯義突變：c.943 C＞T(p.R315C)，c.1340 C＞T(p.S447L)，c.674 G＞A(p.R225Q)，c

9、.1016 G＞C(p.R339P)，c.1157 G＞C(p.G386V)，一種沒有報道的無義突變，c.805 C＞T(p.R269X)，一種沒有報道的缺失突變c.1827_1838del(p.S610_D613del)。9例中純合突變3例，復合雜合突變5例，還有1例到目前為止僅找到一處雜合突變。在隨后的家系分析中，家系資料齊全的患者突變均來自父母雙方，父母均為表型正常的攜帶者，家系資料因種種原因缺少一方者，只能推測另一個突變來自缺少

10、方。2例患者沒有發(fā)現(xiàn)明確的外顯子突變，國外的研究發(fā)現(xiàn)臨床診斷為VWM的患者，發(fā)現(xiàn)EIF2B1～5基因突變的概率有95％，另外5％可能與內(nèi)含子、5’非翻譯區(qū)及3’非翻譯區(qū)有關，這方面尚需要進一步研究。 結論：本實驗首次在國內(nèi)建立了VWM的EIF2B1-5基因診斷方法，且首次在國內(nèi)從基因水平上確診了9例患者，發(fā)現(xiàn)了12種突變，這些突變來自父母雙方，父母均為表型正常的攜帶者。其中有7種突變是國內(nèi)外沒有報道的新突變。此研究結果為相關患者