腺病毒介導XAF1基因誘導肝癌細胞凋亡的研究.pdf

1、上海交通大學碩士學位論文腺病毒介導XAF1基因誘導肝癌細胞凋亡的研究姓名：朱黎明申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學（消化系?。┲笇Ы處煟和克?0090501上海交通大學醫(yī)學院碩士學位論文中文摘要2跡法檢測XAF1基因表達。2.甲基噻唑基四唑（MTT）、AnnexinVFITCPI雙染和原位末端標記（TUNEL）法檢測感染Ad5F35XAF1前后細胞增殖和凋亡變化；以蛋白質印跡法檢測凋亡相關蛋白Caspase3、Caspase8、Caspa

2、se9、PARP和Cytochromec的表達。3.建立肝癌細胞的裸鼠移植瘤模型研究Ad5F35介導XAF1基因在體內對肝癌生長的抑制作用及評價其治療的安全性。結果結果1.成功構建重組腺病毒Ad5F35XAF1、Ad5F35Null和Ad5F35EGFP。Ad5F35EGFP感染48h，MOI為2.0時，92%以上的肝癌細胞表達綠色熒光蛋白，提示Ad5F35病毒載體有較強的感染效率；XAF1基因的mRNA和蛋白的表達水平在三株肝癌細胞株

3、均較低甚至不表達感染Ad5F35XAF1后，該基因的表達水平均明顯升高；Ad5F35XAF1按不同MOI和不同時間感染SMMC7721細胞后，XAF1mRNA和蛋白表達均明顯增高而感染對照病毒Ad5F35Null的細胞其XAF1mRNA和蛋白表達水平無明顯變化。2.腺病毒載體介導的XAF1基因呈劑量和時間依賴性地抑制肝癌細胞增殖和誘導肝癌細胞凋亡，并伴隨Caspase3、Caspase8、Caspase9、PARP等凋亡相關蛋白的裂解和