大鼠凍存卵巢組織自體異位移植后長期功能評(píng)估.pdf

1、目的：評(píng)估成年雌性Wistar大鼠凍存卵巢組織自體異位移植后的長期生殖、內(nèi)分泌功能。 方法：將78只健康、存在規(guī)律動(dòng)情周期的性成熟雌性Wistar大鼠，按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組（1組，15只）、新鮮組織移植組（2組，24只）、凍存組織移植組（3組，24只）和去勢(shì)組（4組，15只）。1組：僅行假手術(shù)，常規(guī)麻醉后切開大鼠皮膚、肌肉，保留卵巢，依次縫合肌肉、皮膚；2組：切除大鼠雙側(cè)卵巢，將卵巢用生理鹽水沖洗干凈后平均切為8塊，每塊組

2、織塊體積約為1mm×2mm×2mm。隨機(jī)取6塊新鮮卵巢組織自體異位多點(diǎn)移植于每側(cè)腎被膜下；3組：切除大鼠雙側(cè)卵巢，將每側(cè)卵巢用生理鹽水沖洗干凈后平均切為8塊，采用玻璃化冷凍方法冷凍保存，做好標(biāo)記。2～4周后將凍存卵巢組織復(fù)蘇，隨機(jī)取6塊自體卵巢組織塊多點(diǎn)移植于每側(cè)腎被膜下；4組：切除大鼠雙側(cè)卵巢，作為去勢(shì)對(duì)照組。術(shù)后定期行陰道沖洗術(shù)，檢查陰道脫落細(xì)胞直至有典型角化細(xì)胞出現(xiàn)。分別于移植后5、8、10個(gè)月隨機(jī)抽取各處理組1/3數(shù)量動(dòng)物，結(jié)合

3、陰道細(xì)胞學(xué)檢查在大鼠動(dòng)情期從其頸靜脈抽血監(jiān)測(cè)血清雌、孕激素水平，評(píng)估移植后卵巢組織的生殖內(nèi)分泌功能。大鼠處死后取其卵巢及子宮，稱量子宮濕重、做卵巢及子宮組織切片。通過光鏡下行組織學(xué)觀察，計(jì)數(shù)各級(jí)卵泡數(shù)目，反映移植后卵巢組織存活及卵泡生長發(fā)育情況。 結(jié)果：所有動(dòng)物模型中，新鮮及凍存卵巢組織異位移植后都可觀察到存活組織塊，組織塊表面肉眼可見有新生血管覆蓋。2、3組大鼠卵巢移植術(shù)后陰道細(xì)胞學(xué)檢查均有典型角化細(xì)胞出現(xiàn)。2、3組大鼠動(dòng)情期

4、血清雌、孕激素水平與假手術(shù)組無顯著性差異（P>0．05），且均明顯高于去勢(shì)組（P<0．01）。移植后凍存卵巢組織與新鮮卵巢組織光鏡下均可觀察到各級(jí)卵泡及黃體存在。冷凍復(fù)蘇后組織與新鮮組織各級(jí)卵泡構(gòu)成比無顯著性差異（P>0．05）。從2、3組取得的移植后卵巢組織中均存在各級(jí)卵泡，其各級(jí)卵泡構(gòu)成比與同期1組大鼠卵巢組織相比均無顯著性差異（P>0．05）。與冷凍復(fù)蘇后組織相比，3組大鼠分別在移植后5、8、10個(gè)月取得的卵巢組織中各級(jí)卵泡構(gòu)成比