大鼠胚胎卵巢原位移植的功能和子代健康安全性初步研究.pdf

1、目的：建立大鼠胚胎卵巢原位移植模型，探討大鼠胚胎卵巢原位移植后的生殖內(nèi)分泌功能恢復(fù)情況，為進(jìn)一步研究其生育和子代健康安全性提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法：將90只日齡50-60天的雌性SD大鼠隨機(jī)分為移植受體組(研究組)50只、正常對(duì)照組(陽(yáng)性對(duì)照組)20只、去勢(shì)對(duì)照組(陰性對(duì)照組)20只。研究組行孕17-19天胎齡胚胎卵巢原位移植(同時(shí)切除自身卵巢)、陽(yáng)性對(duì)照組僅行開(kāi)關(guān)腹手術(shù)、陰性對(duì)照組行自身卵巢切除而不行胚胎卵巢移植。于術(shù)后45

2、天隨機(jī)取研究組、陽(yáng)性和陰性對(duì)照組大鼠分別10只，共30只(其余60只雌性大鼠繼續(xù)飼養(yǎng)供第二章實(shí)驗(yàn)用)，采用電發(fā)光方法檢測(cè)各組大鼠血清雌、孕激素水平，并同時(shí)剖腹探查卵巢發(fā)育情況、切除卵巢行病理切片HE染色觀察卵泡發(fā)育情況。
　　 結(jié)果：(1)移植術(shù)后雌孕激素恢復(fù)情況：移植后45天，研究組、陽(yáng)性和陰性對(duì)照組(每組各10只雌性大鼠)的雌激素均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差分別為114.65±15.59 pmol/L、121.71±14.92 pmol/L

3、和56.51±7.82 pmol/L，孕激素分別為12.79±4.40 ng/ml、13.00±1.18 ng/ml和3.70±0.68 ng/ml。研究組和陽(yáng)性對(duì)照組間雌孕激素水平比較無(wú)顯著性差異(p>0.05)，而研究組和陰性對(duì)照組間雌孕激素水平比較有顯著性差異。(p<0.05)。
　　 (2)移植后卵巢發(fā)育情況：移植后45天，研究組、陽(yáng)性和陰性對(duì)照組的卵巢容積均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差分別為0.22±0.07 ml、0.24±0.09m

4、l和0 ml，研究組、陽(yáng)性對(duì)照組間卵巢容積比較無(wú)顯著性差異(p>0.05)。光鏡下研究組和陽(yáng)性對(duì)照組卵巢內(nèi)均可見(jiàn)不同階段發(fā)育的卵泡和黃體形成。
　　 結(jié)論：大鼠胚胎卵巢原位移植術(shù)后的卵巢可以存活，并可生長(zhǎng)發(fā)育而具有排卵功能，其生殖內(nèi)分泌功能可以恢復(fù)。
　　 目的：探討大鼠胚胎卵巢原位移植后生育功能的恢復(fù)情況。
　　 方法：將第一章研究中沒(méi)有處死的大鼠胚胎卵巢原位移植受體組(研究組)40只、正常對(duì)照組(陽(yáng)性對(duì)照組)

5、10只、去勢(shì)組(陰性對(duì)照組)10只雌性大鼠納入本實(shí)驗(yàn)中。將三組動(dòng)物于術(shù)后45天后分籠分別與日齡45—65天雄性大鼠同籠飼養(yǎng)(雌雄比例為2：1)，觀察40天，比較各組雌鼠妊娠和生育情況(觀察到母鼠妊娠后即和雄性大鼠分開(kāi)飼養(yǎng))。觀察40天后解剖研究組未孕雌性大鼠探查卵巢發(fā)育及其周?chē)尺B并與正常對(duì)照組盆腔解剖情況比較，并觀察卵泡發(fā)育情況，以判斷沒(méi)有生育的雌性大鼠的不孕原因。
　　 結(jié)果：(1)妊娠情況：研究組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組妊

6、娠率分別為47.5％(19/40)、100％(10/10)、0.0％(0/10)。研究組雌性大鼠觀察40天內(nèi)的妊娠低于陽(yáng)性對(duì)照組的，兩者比較有顯著性差異(p<0.05)；研究組和陰性對(duì)照組的妊娠率比較有顯著性差異(p<0.05)。(2)子代個(gè)數(shù)：研究組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組平均每次妊娠子代數(shù)目分別為7.0±2.2、10.5±2.3、0，研究組和陽(yáng)性對(duì)照組每次妊娠生育的子代個(gè)數(shù)比較有顯著性差異(p<0.05)。(3)不孕原因分析：研究組

7、21只不孕大鼠卵巢內(nèi)可見(jiàn)成熟卵泡發(fā)育及黃體；但其卵巢及輸卵管周?chē)嬖趪?yán)重的粘連，而正常對(duì)照組無(wú)明顯的盆腔粘連，這些可能是導(dǎo)致其不孕的主要原因。
　　 結(jié)論：雌性大鼠胚胎卵巢原位移植后具有自然生育功能；但由于術(shù)后盆腔局部粘連，它們術(shù)后妊娠率較正常對(duì)照組低，每次妊娠生育子代個(gè)數(shù)較正常對(duì)照組少。
　　 目的：初步探討大鼠胚胎卵巢原位移植術(shù)后自然生育的子代的健康安全性問(wèn)題。
　　 方法：(1)分別觀察第二章研究中行胚胎

8、卵巢原位移植術(shù)后確定妊娠的19只雌性大鼠和第二章研究中陽(yáng)性對(duì)照組全部妊娠的10只雌性大鼠，妊娠后有無(wú)流產(chǎn)癥象、有無(wú)死產(chǎn)、有無(wú)幼鼠死亡(觀察至出生后3日)，并比較觀察結(jié)果；(2)隨機(jī)抽取第二章研究中進(jìn)行了胚胎卵巢原位移植術(shù)后自然生育的大鼠子代(研究組)及陽(yáng)性對(duì)照組生育的大鼠子代(正常對(duì)照組)各40只，共80只子代大鼠；比較研究組(40只)和正常對(duì)照組(40只)35日齡時(shí)的體重；(3)應(yīng)用常規(guī)G顯帶技術(shù)對(duì)兩組子代大鼠進(jìn)行核型分析，觀察大鼠的

9、染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)的變異情況。以初步了解大鼠胚胎卵巢原位移植術(shù)后生育的子代的健康安全性。
　　 結(jié)果：(1)第二章研究中行胚胎卵巢原位移植術(shù)后確定妊娠的19只雌性大鼠和第二章研究中陽(yáng)性對(duì)照組全部妊娠的10只雌性大鼠，妊娠后均無(wú)流產(chǎn)癥象、無(wú)死產(chǎn)、無(wú)幼鼠生后3天內(nèi)死亡；(2)子代生長(zhǎng)發(fā)育比較：研究組和正常對(duì)照組35日齡的體重(x±s)分別為93.80±4.93g和94.13±4.53g。兩組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。(3)胚胎