大鼠原位肺移植手術流程的改良以及長期觀察移植肺的功能.pdf

1、背景：
　　肺移植(Lung transplantation)是治療慢性阻塞性肺疾病，特發(fā)性肺纖維化，特發(fā)性肺動脈高壓等終末期肺部疾病的有效方法[1]。據(jù)國際心肺移植協(xié)會(TheInternational Society for Heart and Lung Transplantation，ISHLT)的統(tǒng)計，截止2013年6月30日，全世界范圍內(nèi)已完成3772例成人心肺聯(lián)合移植手術和47647例成人肺移植手術[2]。雖然近年來外

2、科技術，免疫抑制劑和抗感染藥物的使用方面有了很大的提高，但由于其特殊的解剖結構和生理功能，肺移植術后排斥反應以及感染的發(fā)生率顯著高于其他實體臟器器官移植患者。因此，肺移植術后患者的長期生存率明顯比其它實體臟器器官移植患者低。
　　肺移植術后慢性排斥反應是制約肺移植術后患者長期生存率的主要原因，閉塞性細支氣管炎(Bronchiolitis obliterans，BO)是肺移植術后慢性排斥反應的主要表現(xiàn)形式。BO病理表現(xiàn)為細支氣管上皮

3、損傷引起的間質(zhì)細胞浸潤終末呼吸道并引起纖維增生致管腔狹窄，閉塞性細支氣管炎綜合征(Bronchiolitis obliteranssyndrome，BOS)是BO的臨床表述，表現(xiàn)為肺功能進行性不可逆的下降[3].目前，BOS的發(fā)病機制尚不完全清楚，而且缺乏有效的治療措施。
　　實驗動物模型在肺移植以及肺移植術后慢性排斥反應的研究中起著重要的推動作用。目前，大鼠原位肺移植模型已用于肺移植術后缺血再-灌注損傷和急性排斥反應的研究，而肺

4、移植術后慢性排異反應的研究大多采用氣管原位/異位移植模型，以復制BOS的典型病理表現(xiàn)。大鼠氣管原位/異位模型操作難度低，可重復性高，但是，氣管原位/異位移植模型不符合正常的生理解剖特點，臨床相關性低，因此，對于利用氣管原位/異位移植模型研究肺移植術后BOS的可行性仍有很多爭議。穩(wěn)定、可重復、長期存活的肺移植模型是建立原位肺移植術后慢性排斥反應模型的關鍵。目前，國內(nèi)關于大鼠原位左肺移植模型的研究多為短期實驗模型，術后長期觀察移植肺的功能的

5、報道較少。此外，大鼠原位肺移植手術的操作難度大以及術后受體大鼠的長期生存率低，肺不張的發(fā)生率高等因素也限制了肺移植術后慢性排斥反應的研究。因此，簡化大鼠原位肺移植模型的手術流程，建立一個穩(wěn)定、可復制、長期存活的大鼠原位肺移植模型有利于肺移植以及肺移植術后慢性排斥反應的研究。
　　目的：
　　對大鼠原位肺移植手術的流程進行改良并簡化吻合過程，以提高手術成功率以及受體存活率，長期觀察受體大鼠移植肺的功能，為肺移植相關的研究以及肺

6、移植術后慢性排斥反應的研究提供穩(wěn)定、可重復、長期存活的大鼠原位左肺移植模型的方法。
　　方法：
　　對大鼠原位肺移植手術流程進行改良，簡化供體和受體相應管腔的吻合難度。用改良的手術流程以套管法（Cuff technique）分別吻合左肺靜脈、左肺動脈、左肺支氣管，建立大鼠原位左肺移植模型。記錄手術成功率，手術時間，移植肺熱缺血時間，術后受體存活率以及移植肺的功能，分別于肺移植術后30d、60d、90d拍攝胸部CT，評估大鼠移

7、植肺的形態(tài)和膨脹情況;并且分別于30d、60d、90d處死一組受體(=5)，解剖觀察移植肺大體的膨脹情況以及形狀，行蘇木精-伊紅(Hematoxylin-Eosin，HE)染色、Masson染色觀察移植肺的病理表現(xiàn)。正常Lewis大鼠作為對照組。
　　結果：
　　本實驗均在單人目視下完成操作。大鼠原位肺移植手術流程改良后總手術成功率為93.3％(28/30);供體手術時間為35±7min;熱缺血時間為8±3min;受體手術時

8、間為42±12min;短期存活率（≥1天）為100％(28/28);長期存活率(≥30d)為78.6％(22/28)，存活最長的模型存活時間超過180天。術后30d、60d、90d拍攝胸部CT顯示術后長期存活的受體移植肺的形狀基本正常，膨脹肺功能良好，有少量的實變。解剖顯示移植肺的膨脹，顏色均與受體健側右肺無明顯差別。HE染色和Masson染色均提示肺實質(zhì)和間質(zhì)的結構基本正常，有少量的炎癥細胞浸潤及實變。
　　結論：
　　用