大鼠自體胸腺腎模型的建立和功能評(píng)估.pdf

1、胸腺是中樞性免疫器官，發(fā)揮對(duì)T淋巴細(xì)胞的選擇發(fā)育功能。自從發(fā)現(xiàn)胎豬胸腺可以選擇發(fā)育人造血干細(xì)胞，人們?cè)O(shè)想通過(guò)胸腺移植，使供體的胸腺在受體體內(nèi)選擇發(fā)育受體T淋巴細(xì)胞來(lái)誘導(dǎo)受體對(duì)供體特異性免疫耐受。已有的研究表明小型豬有功能胸腺的存在對(duì)誘導(dǎo)免疫耐受的形成是至關(guān)重要的，至少在免疫耐受的形成階段是不可缺少的。在應(yīng)用異體胸腺組織移植來(lái)誘導(dǎo)免疫耐受時(shí)，由于胸腺極富含供體組織抗原，導(dǎo)致移植的胸腺受到強(qiáng)烈排斥而引起免疫耐受誘導(dǎo)失敗，因此受體胸腺的提前切

2、除是必要的。即便如此，胸腺組織移植仍不能誘導(dǎo)小型豬特異性免疫耐受的穩(wěn)定形成，但研究顯示如果把胸腺作為一個(gè)帶血管的器官來(lái)移植，在一定程度上可以彌補(bǔ)胸腺組織移植的缺陷，而且能更好地誘導(dǎo)特異性免疫耐受的形成。為了達(dá)到這一目的，已有的研究嘗試了兩種非常有創(chuàng)意的途徑，一是“胸腺腎”移植，二是帶血管的“胸腺小葉”移植，均取得了良好的效果。前者是把小型豬胸腺行自體腎包膜下移植，構(gòu)建胸腺腎，以使胸腺組織在移植前血管化，研究顯示術(shù)后60天移植在小型豬腎包

3、膜下的胸腺組織恢復(fù)正常的宏觀和微觀結(jié)構(gòu)，并支持胸腺細(xì)胞的成熟發(fā)育。我們嘗試用大鼠建立了自體胸腺腎模型，以求在行大鼠腎移植的同時(shí)能同步將供體血管化的胸腺移植給受體，并對(duì)移植胸腺的存活及功能的恢復(fù)做了初步的觀察評(píng)估，觀察去胸腺成年大鼠自體胸腺在自體腎包膜下血管重建，功能恢復(fù)的時(shí)間和大鼠外周血T細(xì)胞池重建恢復(fù)的時(shí)間。 方法： 1．SD大鼠分成4組，Ⅰ：去胸腺組(n=12，150～250g)，Ⅱ：自體胸腺腎模型組(n=15，15

4、0～250g)，Ⅲ：假手術(shù)組(n=5，50～100g)，Ⅳ：從Ⅰ組中抽取5只在第8周時(shí)加去脾臟。 2．通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)和組織形態(tài)學(xué)來(lái)評(píng)價(jià)胸腺。腎模型中胸腺的血運(yùn)重建情況及功能。 結(jié)果： 1．Ⅱ組術(shù)后2W已見(jiàn)到明顯有血管自腎門(mén)生長(zhǎng)入腎包膜下的胸腺組織中，8W時(shí)移植的胸腺組織生長(zhǎng)增厚，組織學(xué)檢查顯示正常胸腺組織結(jié)構(gòu)。6W后，Ⅰ組CD4-CD8-T淋巴細(xì)胞比例仍持續(xù)上升，在Ⅳ組中升高得更明顯，而Ⅱ組6W后開(kāi)始逐漸下降。Ⅰ組CD

5、4+T和CD8+T淋巴細(xì)胞在術(shù)后6W后繼續(xù)下降，而Ⅱ組開(kāi)始回升。Ⅰ組CD4+CD8+T淋巴細(xì)胞在術(shù)后6W后仍有波動(dòng)，后續(xù)的檢測(cè)顯示呈低水平，而Ⅱ組6W后較平穩(wěn)。3～4個(gè)月后腎包膜下移植的胸腺組織開(kāi)始逐漸退化。 2．6W后，Ⅰ組CD4-CD8-T淋巴細(xì)胞比例仍持續(xù)上升，在Ⅳ組中升高得更明顯，而Ⅱ組6W后開(kāi)始逐漸下降。Ⅰ組CD4+T和CD8+T淋巴細(xì)胞在術(shù)后6W后繼續(xù)下降，而Ⅱ組開(kāi)始回升。Ⅰ組CD4+CD8+T淋巴細(xì)胞在術(shù)后6W后仍