化療導(dǎo)致小鼠腸黏膜損傷、再生調(diào)控基因的篩選及功能研究.pdf

1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文化療導(dǎo)致小鼠腸黏膜損傷、再生調(diào)控基因的篩選及功能研究姓名：韓曉東申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：鄭起20090501j≯麥疊名謦化療導(dǎo)致小鼠腸黏膜損傷、再生調(diào)控基因的篩選及功能研究體重、腹瀉情況；處死后取相同部位小腸甲醛固定、石蠟包埋、HE染色行評估黏膜損傷程度的半定量組織學(xué)評分；PCNA染色了解腺窩細(xì)胞增生情況。根據(jù)化療后動(dòng)物的表現(xiàn)(體重、腹瀉變化及死亡情況)；組織學(xué)變化(HE染色及半定量組織學(xué)評分)；

2、細(xì)胞學(xué)變化(PCNA染色，腺窩細(xì)胞增殖情況)等方面綜合評價(jià)，選擇一個(gè)合適的化療劑量，使腸黏膜具有明顯的損傷和隨后的再生修復(fù)。我們發(fā)現(xiàn)在不同劑量組中，化療后第3天黏膜炎半定量組織學(xué)評分最高，提示小腸黏膜損傷程度最嚴(yán)重，而后逐漸恢復(fù)，到第7天基本恢復(fù)到用藥前水平，在HE及PCNA染色切片中亦可發(fā)現(xiàn)同樣趨勢。而150mg／kg組小鼠黏膜損傷程度較輕，腹瀉不明顯；250mg／kg組黏膜損傷重、恢復(fù)慢，實(shí)驗(yàn)后期50％d、鼠死亡，影響觀察結(jié)果。20

3、0mg／kg組小鼠具有明顯腹瀉癥狀，小腸黏膜炎癥明顯，不會(huì)導(dǎo)致小鼠死亡，故選擇200mg／kg為動(dòng)物建模的藥物劑量，化療后03天為損傷期，47天黏膜處于恢復(fù)期。該動(dòng)物模型是我們首次建立并應(yīng)用，是研究小腸黏膜再生機(jī)理的適用的動(dòng)物模型。我們推測對黏膜再生具有調(diào)節(jié)作用的因子在化療后黏膜損傷、恢復(fù)的過程中，其基因表達(dá)水平會(huì)出現(xiàn)一定的波動(dòng)。根據(jù)動(dòng)物模型中小腸黏膜損傷、再生的時(shí)間過程，取5FU200mg／kg注射后O、1、3、5、7d的小腸，抽取高