中子及γ射線對腸免疫組織放射損傷效應(yīng)及IL-2對腸上皮再生調(diào)控研究.pdf

1、目的：中子輻射對腸道損傷較γ射線程度重、發(fā)生早、療效差、難恢復(fù)，迄今機(jī)制未明，腸免疫組織參與其損傷修復(fù)過程，然關(guān)于中子對腸免疫組織損傷特點及IL-2對腸上皮損傷及修復(fù)作用及其機(jī)制尚未見報道。本文研究中子輻射后腸免疫組織病變特點及其對腸上皮再生調(diào)控作用，為其防治提供新思路。 方法：采用2．5-5．5Gy中子及5．5-12GyY射線照射350只BALB／C小鼠和IEC-6細(xì)胞(正常SD大鼠空腸隱窩上皮細(xì)胞)，并用IL-2(25×10

2、3～1×10sU／L)及JAKi阻斷劑A77．1726于照前12h或照后即刻處理細(xì)胞，分別于照后6h，12h，1～5d，7d，14d，21d及28d活殺取材或15min,30min,lh，3h，6h，9h，12h,1～3d收集細(xì)胞，采用光鏡、電鏡、免疫組化、MTT、FACS、免疫印跡等方法對比研究中子及γ射線照后腸免疫組織損傷、恢復(fù)規(guī)律和IL-2對IEC-6再生作用及其機(jī)制。 結(jié)果：(1)腸免疫組織病理變化：中子組2．5Gy照后

3、3d內(nèi)，淋巴細(xì)胞發(fā)生凋亡、壞死，5d見再生，14---21d漸恢復(fù)，4．0和5．5Gy照后以壞死多見，未見明顯恢復(fù)；γ射線組5．5Gy照后病變與中子2．5Gy組類似，但程度輕、再生早、凋亡多見，12Gy照后損傷程度介于中子4．0~5．5Gy組之間。(2)腸PP內(nèi)T、B細(xì)胞及漿細(xì)胞變化：2．5Gy中子照后5d內(nèi)，進(jìn)行性減少，T／B比例升高，14d后恢復(fù)，其中T及漿細(xì)胞均呈量一效關(guān)系。(3)腸免疫因子變化：2．5Gy中子和5．5Gyγ射線照

4、后5d內(nèi)，IL-2，4及IgA均進(jìn)行性減少，7～10d少量表達(dá)，14d后漸恢復(fù)，IFNγ，TGFB3，TNFa和IL一18于照后2d內(nèi)進(jìn)行性減少，3～7d增多，14d后恢復(fù)，均呈量一效關(guān)系。(4)IL-2對IEC-6作用及IL-2R[3／JAK~／STATs通路變化：中子4Gy照后3d內(nèi)，IEC-6增殖活力降低，照后1d凋亡和壞死增多，以壞死為主，丫射線4~12Gy照后1d以凋亡多見；給予IL-2后1～3d，IEC-6增殖活力提高，凋亡

5、減少，且呈量一效關(guān)系，同時IL-2R表達(dá)增加，JAKi激酶和轉(zhuǎn)錄因子STATs活化增強(qiáng)；IEC-6經(jīng)A77—1726、IL-2與8Gy丫線共處理后24h增殖活力降低，STATs活化減弱。 結(jié)論：(1)中子致腸免疫組織損傷重，恢復(fù)慢，損傷期凋亡與壞死并存，4．0和5．5Gy組以壞死為主，而γ射線照射以凋亡為主。(2)內(nèi)源性Iga及腸上皮生長刺激因子IL-2、IL-4于中子損傷期減少，而生長抑制及凋亡誘導(dǎo)因子IFN~，TGFβ，TN