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文檔簡介
1、目的:
研究參蘇飲對“肺氣虛外感”小鼠肺組織β-防御素-2表達與TLR4/NF-κB信號通路的相關性。
方法:
1.以“煙熏聯(lián)合氣管注射LPS”的方法復制“肺氣虛外感”小鼠模型,測定模型小鼠的一般狀況、體重、肺指數(shù)、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的變化,并結合肺部病理組織形態(tài)學變化,判定模型的成功復制;
2.“酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)”測定參蘇飲對“肺氣虛外感”小鼠肺泡灌洗液BD-2含量的影響;
2、 3.“免疫組化(SP法)”測定參蘇飲對“肺氣虛外感”小鼠肺組織 TLR4、NF-κBp65、BD-2蛋白表達的影響;
4.“實時熒光定量 PCR(qRT-PCR)”測定參蘇飲對“肺氣虛外感”小鼠肺組織 TLR4、NF-κBp65、BD-2mRNA表達的影響。
結果:
1.“煙熏聯(lián)合氣管注射LPS”對小鼠一般狀況、體重、肺指數(shù)、脾指數(shù)、胸腺指數(shù)的影響煙熏后動物活動逐漸減少、皮毛無光澤、松散發(fā)黃、精神萎靡、拉
3、稀樣便;肺臟病理組織學檢測顯示:空白組小鼠肺臟層胸膜無結締組織增生、增厚、無結構性破壞,支氣管無炎癥表現(xiàn);模型組肺臟層胸膜結締組織增生、增厚,肺小支氣管及血管周圍可見炎細胞圍管浸潤,肺間質(zhì)輕度炎癥。模型組動物體重增長緩慢,煙熏15天后與空白組相比有顯著差異(p<0.01);20天造模完成后模型組肺、脾、胸腺重量與空白組相比有顯著差異(p<0.05)。
2.參蘇飲對“肺氣虛外感”證小鼠肺泡灌洗液BD-2含量的影響與空白組比較,各
4、組肺泡灌洗液中BD-2含量均顯著升高(P<0.05);與模型組相比,全方組肺泡灌洗液中BD-2含量均顯著下降(P<0.05),益氣解表組、止咳化痰組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
3.參蘇飲對“肺氣虛外感”小鼠肺組織TLR4、NF-κBp65、BD-2蛋白表達的影響與空白對照組比較,模型組小鼠肺組織中NF-κB p65、BD-2、TLR4蛋白的含量均顯著升高(P<0.05);與模型組比較,全方組、益氣解表組、止咳化痰組小鼠
5、肺組織中NFκB p65、BD-2、TLR4蛋白的含量均顯著地下降(P<0.05);全方組、益氣解表組、止咳化痰組之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
4.參蘇飲對“肺氣虛外感”小鼠肺組織 TLR4、NF-κBp65、BD-2mRNA表達的影響與空白對照組比較,模型組小鼠肺組織中NF-κB p65 mRNA、BD-2 mRNA、TLR4 mRNA的含量均顯著升高(P<0.05);與模型組比較,全方組、益氣解表組、止咳化痰組小鼠肺
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