紅花對硬皮病小鼠皮膚和肺組織纖維化的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的：
　　通過建立硬皮病小鼠模型，觀察紅花對硬皮病小鼠皮膚和肺組織纖維化以及IL-17、IL-6的影響，從免疫炎癥的角度探討紅花抗硬皮病纖維化的機(jī)制。
　　方法：
　　將128只BALB/C小鼠隨機(jī)分為4組:空白組、模型組、強(qiáng)的松組、紅花組，每組32只;博來霉素誘導(dǎo)建立硬皮病小鼠模型，造模的同時，空白組和模型組給予生理鹽水灌胃，強(qiáng)的松組給予強(qiáng)的松溶液灌胃，紅花組給予紅花水煎液灌胃，分別在第7天、第14天、第21天、第

2、28天分批處死小鼠。取眼動脈血，ELISA法檢測血清中IL-17、IL-6的濃度;取皮膚及肺組織，HE染色和Masson染色觀察小鼠皮膚和肺組織病理改變，并檢測真皮厚度;采用樣本水解法檢測皮膚和肺組織羥脯氨酸含量;免疫組化法檢測皮膚和肺組織IL-17、IL-6的定位及表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、HE染色
　　空白組皮膚和肺組織在各個觀察時間點均未見明顯改變，皮膚和肺組織結(jié)構(gòu)完整，真皮稍有增厚，真皮層及皮下組織和肺組織可

3、見少量炎癥細(xì)胞浸潤。模型組皮膚和肺組織第7天出現(xiàn)大量的炎癥性細(xì)胞浸潤，真皮變厚;第14天，真皮進(jìn)一步增厚，炎癥細(xì)胞進(jìn)一步增多;第21天，真皮增厚明顯，炎癥細(xì)胞浸潤相對減少，出現(xiàn)膠原纖維增生，成纖維細(xì)胞增多;第28天，真皮進(jìn)一步增厚，炎癥細(xì)胞浸潤相對減少，膠原纖維、成纖維細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步增多。強(qiáng)的松組和紅花組在各個時間點的炎癥細(xì)胞浸潤較模型組輕，其中第7天和第14天，強(qiáng)的松組炎癥細(xì)胞浸潤較紅花組輕;第21天和第28天，紅花組炎癥細(xì)胞浸潤少于

4、強(qiáng)的松組。
　　2、Masson染色
　　空白組皮膚和肺組織在各個觀察時間點均未見明顯改變，出現(xiàn)少量膠原纖維增生。模型組皮膚和肺組織第14天時出現(xiàn)成纖維細(xì)胞數(shù)量增多、膠原纖維增生、纖維束排列不整齊;至第28天時，成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯增多，膠原纖維的形成進(jìn)一步增多，出現(xiàn)大量膠原纖維束形成，排列紊亂，纖維的間隙變窄或者消失。強(qiáng)的松組和紅花組真皮下及肺組織的膠原形成較模型組減少，其中，紅花組少于強(qiáng)的松組。
　　3、真皮厚度

5、r>　　空白組真皮厚度在各個時間點均無明顯變化;造模各組真皮厚度逐漸增加，第28天到達(dá)高峰。第7天:與空白組比較，模型組的真皮厚度明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，強(qiáng)的松組和紅花組的真皮厚度相對降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。第14天:與空白組比較，其余三組真皮厚度均不同程度增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，強(qiáng)的松組和紅花組真皮厚度相對降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。第21天和

6、第28天:與空白組比較，其余三組真皮厚度均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，強(qiáng)的松組和紅花組真皮厚度相對降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與強(qiáng)的松組比較，紅花組真皮厚度降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4、皮膚和肺組織羥脯氨酸(HYP)含量
　　空白組羥脯氨酸含量在各個時間點均無明顯變化;造模各組羥脯氨酸含量隨時間逐漸增加，第21天上升明顯，第28天達(dá)到最高峰。第7天:各組羥脯氨酸含量均

7、無明顯變化。第14天:與空白組比較，其余三組羥脯氨酸含量不同程度升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，強(qiáng)的松組和紅花組羥脯氨酸含量均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。第21天和第28天:與空白組比較，造模各組羥脯氨酸含量均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，強(qiáng)的松組和紅花組羥脯氨酸含量均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與強(qiáng)的松組比較，紅花組羥脯氨酸含量降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.0

8、5）。
　　5、IL-17、IL-6的表達(dá)
　　ELISA和免疫組化結(jié)果顯示，空白組血清和組織中的IL-17和IL-6表達(dá)在各個時間點均無明顯變化，造模各組血清和組織中的IL-17、IL-6表達(dá)均在第7-14天明顯升高;第21-28天仍有緩慢增高。與空白組比較，其余三組IL-17、IL-6表達(dá)均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與模型組比較，強(qiáng)的松組和紅花組IL-17、IL-6表達(dá)均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.