擬菊酯及多環(huán)芳烴內(nèi)暴露水平與男性生殖激素相關(guān)性研究.pdf

1、而我國農(nóng)藥的生產(chǎn)、使用和出口量均逐年上升，2007年農(nóng)藥總產(chǎn)量為173.1萬噸，比2006年同比增長24.3％，躍居世界第一位。由于其生產(chǎn)和使用面廣量大，污染十分嚴(yán)重，造成的急性中毒及慢性潛在危害令人堪憂。擬菊酯是一類重要的農(nóng)藥殺蟲劑，80年代起逐步在全世界廣泛使用，用以替代一些高毒農(nóng)藥。由于其殺蟲譜廣，供應(yīng)充足，價格又相對較低，因此在農(nóng)作物生產(chǎn)、家用滅蟲等領(lǐng)域應(yīng)用普遍，同時也是殘留出現(xiàn)頻率和水平最高的農(nóng)藥種類之一。多環(huán)芳烴(PAHs)

2、是廣泛存在于我們生活環(huán)境中的一種污染物，是煤、石油、木材、煙草、有機(jī)高分子化學(xué)物等有機(jī)物不完全燃燒時產(chǎn)生的揮發(fā)性碳?xì)浠瘜W(xué)物，是重要的環(huán)境和食品污染物。迄今已發(fā)現(xiàn)有200多種PAHs，其中有相當(dāng)部分具有致癌性，如苯并[α]芘，苯并[α]蒽等。PAHs污染物已成為環(huán)境污染物中極重要的物質(zhì)。 近年來有關(guān)擬菊酯和PAHs危害的研究不斷增加，結(jié)果顯示都可影響生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，并有可能導(dǎo)致遺傳損害。因此，基于以往對擬除蟲菊酯及PAHs內(nèi)分

3、泌干擾效應(yīng)研究的提示，從不同暴露水平研究這些污染物對男性生殖激素影響是極有價值的，這將有助于我們闡明影響男性生殖功能的環(huán)境危險因素，從而為男性不育的病因?qū)W及其機(jī)制研究提供依據(jù)。 第一部分?jǐn)M菊酯內(nèi)暴露標(biāo)志物檢測方法的建立建立一種靈敏、可靠的氣相色譜.質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)測定方法，以檢測人尿中擬菊酯的主要代謝產(chǎn)物3.苯氧基苯甲酸(3-PBA)的濃度。尿液中加入內(nèi)標(biāo)2-苯氧基苯甲酸(2-PBA)，以正己烷為提取溶劑，在酸性條件下采用

4、液-液萃取法提取目標(biāo)化學(xué)物3-PBA和內(nèi)標(biāo)2-PBA，然后用堿性水溶液反革取，使目標(biāo)化學(xué)物和內(nèi)標(biāo)進(jìn)入水相，去除溶有雜質(zhì)的有機(jī)相，再在酸性條件下以正己烷重新提取水相中的目標(biāo)化學(xué)物和內(nèi)標(biāo)，氮?dú)獯蹈烧和楹?，用N，(特丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺(MTBSTFA)對目標(biāo)化學(xué)物和內(nèi)標(biāo)進(jìn)行衍生化處理，利用GC-MS對衍生化產(chǎn)物進(jìn)行分離檢測，以分析尿液中3-PBA的濃度。尿液中3-PBA在0.05～30μg/L濃度范圍內(nèi)呈良好線性，相關(guān)系

5、數(shù)為0.99；最低檢測限為0.01μg/L，日內(nèi)差在2.4％～3.8％；日間差在8.7％～10.8％；相對回收率為94.3％～120.6％。本方法經(jīng)濟(jì)、可靠，且靈敏度比其它類似方法高，可以快速準(zhǔn)確地檢測人尿液中擬菊酯主要代謝產(chǎn)物3-PBA濃度，從而預(yù)測該類農(nóng)藥在中國普通人群中的暴露水平，并為擬菊酯的安全性評價提供依據(jù)。 第二部分非職業(yè)暴露人群擬菊酯內(nèi)暴露水平與生殖內(nèi)激素相關(guān)性研究許多的農(nóng)藥具有生殖內(nèi)分泌干擾效應(yīng)而被稱為EDCs。

6、擬菊酯是一類在農(nóng)業(yè)和日常生活中最常用的殺蟲劑。本部分研究旨在探討中國非職業(yè)暴露男性人群尿液中擬除蟲菊酯主要代謝產(chǎn)物3-PBA的內(nèi)暴露水平是否與生殖激素的改變有關(guān)。研究對象為來自南京醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院的212名符合入選標(biāo)準(zhǔn)的中國男性。通過GC-MS，我們分析了研究對象尿液中的3-PBA濃度，并進(jìn)行了肌酐(CR)校正。同時分析了研究對象血清中生殖激素的水平，包括促卵泡釋放激素(FSH)、促黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、睪酮(T)、催乳素

7、(PRL)。研究發(fā)現(xiàn)，肌酐校正后3-PBA濃度的中位數(shù)為0.815μg/g·CR。研究結(jié)果提示：3-PBA暴露與LH有正相關(guān)(P=-0.013)，而與E2呈負(fù)相關(guān)(P=0.022)，P值經(jīng)校正后均為0.044；未見3-PBA與FSH、T、PRL有顯著關(guān)聯(lián)。結(jié)果提示擬菊酯暴露對成年男性的生殖激素具有一定的影響。 第三部分多環(huán)芳烴內(nèi)暴露標(biāo)志物檢測方法的建立建立一種高靈敏度、可靠的檢測尿液中多環(huán)芳烴(PAHs)代謝產(chǎn)物1-萘酚(1-N

8、)、2-萘酚(2-N)、2-羥基芴(2-F)、1-羥基芘(1-P)的液相色譜一質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)。尿液經(jīng)β-葡糖苷酸酶水解、固相萃取處理后，經(jīng)LC-MS/MS進(jìn)行分離檢測。尿液中4種PAHs代謝產(chǎn)物在1-100μg/L濃度范圍內(nèi)呈良好線性，相關(guān)系數(shù)r均大于0.99，加標(biāo)回收率在80.8％～122.7％內(nèi)，最低檢出限1-P為0.15gg/L；1-N、2-N、2-F為0.3μg/L。El內(nèi)精密度為3.3％～12.3％，日間

9、精密度為9.6％～21.4％。本方法可靠并可以快速準(zhǔn)確地檢測人尿液中PAHs主要代謝產(chǎn)物的濃度，從而預(yù)測PAHs在中國普通人群中的暴露水平。 第四部分非職業(yè)暴露人群多環(huán)芳烴內(nèi)暴露水平與生殖激素相關(guān)性研究PAHs具有生殖內(nèi)分泌干擾效應(yīng)而被稱為EDCs，是一類廣泛存在于我們的生活環(huán)境中的污染物。本部分研究旨在探討中國非職業(yè)暴露男性人群尿液中PAHs主要代謝產(chǎn)物1-N、2-N、2-F、1-P的內(nèi)暴露水平是否與生殖激素的改變有關(guān)。研究對

10、象為來自南京醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院的642名符合入選標(biāo)準(zhǔn)的中國漢族男性。通過LC-MS/MS，我們分析了研究對象尿液中的1-N、2-N、2-F和1-P濃度，進(jìn)行了CR校正。并分析了研究對象血清中生殖激素的水平，包括FSH、LH、E2、T、PRL。研究發(fā)現(xiàn)1-N、2-N、2-F和1-P經(jīng)CR濃度校正后濃度(μg/g·CR)中位數(shù)分別為：2.44.0、4.176、2.843及1.148。研究結(jié)果顯示：趨勢卡方檢驗和Logistic回歸分析，發(fā)現(xiàn)1