滋補肝腎通絡解毒中藥協(xié)同治療左旋多巴誘導異動癥的機理.pdf

1、帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一種常見于中老年的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,多在60歲以后發(fā)病。其主要表現(xiàn)為患者動作緩慢,四肢或軀體震顫,身體失去了柔軟性而變得僵硬。目前臨床治療帕金森病的首選藥物為L-dopa。左旋多巴誘導異動癥(levodopa-induced dyskinosias,LID)是長期服用L-dopa患者中普遍出現(xiàn)的并發(fā)癥,主要表現(xiàn)為舞蹈癥和手足徐動癥,嚴重影響帕金森病患者的日常生活質量。對于異動癥目

2、前尚無很好的解決方法,臨床只能依靠受體激動劑等減緩癥狀。目前關于異動癥的機理研究集中在多巴胺的波動性刺激,D1、D2受體的協(xié)調作用,“直接通路”上谷氨酸受體的影響以及蛋白和基因水平表達量的變化幾個方面。滋補肝腎通絡解毒中藥已在臨床與左旋多巴合用治療帕金森病以及L-dopa長期治療引起的波動性運動行為,被證明有明顯的減毒增效作用。中藥的協(xié)同作用機理可表現(xiàn)為抗膽堿能作用,受體激動劑作用,抗氧化作用以及調節(jié)相關基因表達。我們的實驗力求從以上幾

3、個方面探索滋補肝腎通絡解毒中藥協(xié)同L-dopa治療LID的作用機理。 本實驗采用兩點單側損毀大鼠腦黑質多巴胺能神經(jīng)元的方法建立PD模型大鼠,之后加之以每日腹腔注射L-dopa總計一個月誘導形成LID大鼠模型。建模成功的LID大鼠分別以滋補肝腎通絡解毒中藥(以下簡稱中藥)灌胃協(xié)同L-dopa(腹腔注射),中藥,L-dopa,生理鹽水(腹腔注射)進行治療。治療為期一個月,期間每周固定時間進行AIM評分一次,評定行為學治療效果。治療一

4、個月后的大鼠分別運用實時定量PCR檢測mRNA表達,用同位素標記技術檢測受體親和力及對動物的氧化應激相關指標進行檢測,以期找出中藥協(xié)同L-dopa治療LID產(chǎn)生作用的分子生物學機理。 通過單側雙點注射6-OHDA至大鼠腦中腦被蓋區(qū)以及黑質網(wǎng)狀部,我們成功獲得了PD模型大鼠,建模成功率為40％。32只PD大鼠經(jīng)過腹腔注射L-dopa-個月后,有25只大鼠出現(xiàn)了符合AIM評分標準且大于20分以上的LID癥狀。 誘導成功的LI

5、D大鼠,在繼續(xù)治療一個月之后,中藥組和停藥組(生理鹽水)異動癥狀明顯減輕,中藥協(xié)同治療組在治療第四周后AIM評分較之西藥組有顯著差異(p<0.05)。在評分的120分鐘內(nèi),中藥協(xié)同治療組在第90min較之西藥組有顯著差異(p<0.05)。分項評分顯示中藥協(xié)同治療組主要在口面部異動以及上肢異動。隨著治療時間的延長異動癥狀有明顯的減弱(p<0.05)。經(jīng)過治療的LID模型大鼠,熒光實時定量PCR結果顯示,損毀側黑質部位VMAT2在中藥組中表

6、達量較之正常大鼠升高,中藥協(xié)同治療組較之西藥組其表達量也有升高。這一趨勢同樣存在于TH以及DAT基因在損毀側黑質部位的表達。但VMAT2增高的趨勢更明顯。 損毀側紋狀體D1、D2受體熒光實時定量PCR結果顯示,D1、D2受體在中藥協(xié)同治療組以及中藥組中的表達都高出正常大鼠水平,其中尤以D2受體中藥組表達升高明顯。同位素標記D2受體親和力實驗證實,損毀側紋狀體D2受體雖然表達量普遍較正常組下降,但受體親和力升高。而中藥協(xié)同治療組較