缺血預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞凋亡和HSP70、GFAP表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　 腦缺血的病理生理過(guò)程是一個(gè)多環(huán)節(jié)、多途徑及多因素的缺血性級(jí)聯(lián)反應(yīng)。許多預(yù)處理措施可誘導(dǎo)腦缺血耐受,如短暫的全身或局部腦缺血、缺氧、內(nèi)毒素、促炎細(xì)胞因子、麻醉劑等。耐受可在數(shù)分鐘內(nèi)快速形成(快速耐受),亦可在數(shù)小時(shí)至數(shù)天內(nèi)迅速建立起神經(jīng)保護(hù)狀態(tài)(延遲耐受)。其中,腦缺血預(yù)處理能增加腦組織對(duì)缺血的耐受。缺血預(yù)處理產(chǎn)生缺血耐受機(jī)制的研究經(jīng)歷了由大體水平到細(xì)胞水平,再到分子水平的發(fā)展過(guò)程,雖然到目前為止,腦缺血耐受產(chǎn)生的確

2、切機(jī)制尚不十分清楚,但大都認(rèn)為預(yù)處理誘導(dǎo)缺血耐受分為早期效應(yīng)和延遲效應(yīng)。熱休克蛋白70(HSP70)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)被認(rèn)為是缺血性損傷時(shí)敏感且可靠的指標(biāo)。
　　 大量研究表明腦缺血預(yù)處理可減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡。同時(shí)也有研究表明腦缺血預(yù)處理后HSP70和GFAP的表達(dá)明顯上調(diào)。但是,腦缺血預(yù)處理抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的機(jī)制是否通過(guò)HSP70和GFAP的表達(dá)上調(diào)來(lái)完成尚不清楚。
　　 本研究的目的在于通過(guò)觀察缺血預(yù)處理后

3、大鼠局灶腦缺血后神經(jīng)細(xì)胞凋亡和HSP70、GFAP表達(dá)的變化探討腦缺血預(yù)處理減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制。
　　 方法：
　　 成年健康SD大鼠72只,隨機(jī)分為預(yù)處理組,缺血組,假手術(shù)組,用大腦中動(dòng)脈栓塞法制作腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ?假手術(shù)組除插線深度外,其余操作與缺血組相同。每組在造模成功后24h、48h、72h取出大鼠腦組織,免疫用組化(Immunohistochemistry,IHC)方法觀察各個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)HSP70蛋白和GFAP

4、蛋白的表達(dá),同時(shí)應(yīng)用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL染色)觀察各個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)細(xì)胞的凋亡情況。
　　 結(jié)果：
　　 免疫組化和原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL染色)結(jié)果顯示,HSP70蛋白和GFAP蛋白大腦皮質(zhì)等部位的細(xì)胞上呈陽(yáng)性表達(dá),其表達(dá)程度隨時(shí)間延長(zhǎng)存在明顯差異。在缺血過(guò)程中,HSP70蛋白和GFAP蛋白的表達(dá)呈高度正相關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1.腦缺血預(yù)處理可抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡。