缺血后處理對(duì)高脂血癥大鼠局灶性腦缺血再灌注后STAT-3、IL-6表達(dá)的影響.pdf

1、目的：對(duì)高脂血癥大鼠施行局灶性腦缺血再灌注術(shù)，觀察缺血后處理對(duì)缺血側(cè)腦組織中STAT-3、IL-6及凋亡細(xì)胞的動(dòng)態(tài)表達(dá)，探討缺血后處理對(duì)高脂血癥大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　方法：將115只SD大鼠隨機(jī)分為兩組，其中一組用普通飼料喂養(yǎng)（10只），另一組用高脂飼料喂養(yǎng)（105只），于28天后，空腹心臟采血檢測(cè)兩組大鼠血清中的血脂指標(biāo)，分別為血清總膽固醇（TC）、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C),高密度脂

2、蛋白（HDL-C），兩組含量比較，若存在明顯差異（P<0.05），表明高血脂血癥大鼠造模成功。隨機(jī)將造模成功的高脂血癥大鼠分為假手術(shù)組（sham組）35只、缺血再灌注組（I/R組）35只、缺血后處理組（IP組）35只。I/R組與IP組動(dòng)物模型的制作均使用改良后的線栓法，并在大鼠腦缺血2小時(shí)，進(jìn)行再灌注，術(shù)后按時(shí)間點(diǎn)的不同將30只大鼠平均分為6組，各時(shí)間點(diǎn)的設(shè)置分別是3h、6h、12h、24h、48h、72h，IP組于再灌注前給予灌注15

3、s/缺血15s，反復(fù)3個(gè)循環(huán)，sham組僅分離頸動(dòng)脈后縫合切口。sham組于手術(shù)后24小時(shí)使用5只大鼠取腦組織行TTC染色，IP組與I/R組于再灌注后24小時(shí)使用5只大鼠行TTC染色，計(jì)算腦梗死體積。各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能缺損情況通過(guò)神經(jīng)功能缺損評(píng)分判斷，不同時(shí)間點(diǎn)腦梗死組織的病理改變通過(guò)HE染色觀察，神經(jīng)細(xì)胞凋亡的數(shù)量采用Tunel法檢測(cè)，STAT-3和IL-6的表達(dá)用免疫組化（Envision法）檢測(cè)。
　　結(jié)果：1.高脂血癥大鼠模

4、型：高脂飼料喂養(yǎng)組大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量明顯高于普通飼料喂養(yǎng)組（P<0.05）；2.神經(jīng)功能缺損評(píng)分：sham組大鼠沒(méi)有出現(xiàn)明顯的神經(jīng)功能缺損癥狀，I/R組于再灌注不同時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)不同程度神經(jīng)功能障礙，以24小時(shí)評(píng)分最低，與其他時(shí)間點(diǎn)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，IP組在12小時(shí)以后神經(jīng)功能評(píng)分顯著高于相同時(shí)間點(diǎn)I/R組（P＜0.05）；3.TTC染色計(jì)算腦梗死體積：sham組術(shù)后24小時(shí)，TTC染色腦組織為均一的紅色

5、，腦組織形態(tài)正常，無(wú)明顯蒼白和水腫；I/R組和IP組術(shù)后24小時(shí)的腦組織內(nèi)可觀察到線栓側(cè)腦組織顏色蒼白，體積大于無(wú)線栓側(cè)的梗死腦組織，I/R組梗死體積較IP組大（P<0.05）；4.神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量及IL-6、STAT-3免疫陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)：sham組的腦組織經(jīng)過(guò)免疫組化染色后在鏡下未見(jiàn)STAT-3免疫陽(yáng)性細(xì)胞，偶可見(jiàn)少量IL-6免疫陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)；I/R組腦缺血再灌注后3h，STAT-3開(kāi)始少量表達(dá)，IL-6表達(dá)增多,24h達(dá)到高峰后開(kāi)

6、始下降，在72h仍有高表達(dá)；IP組STAT-3和IL-6的表達(dá)與I/R組變化趨勢(shì)相似，但數(shù)量顯著減少（P＜0.05），凋亡細(xì)胞變化與STAT-3、IL-6基本一致
　　結(jié)論：1.在建立高脂血癥大鼠模型基礎(chǔ)上制作一側(cè)大腦中動(dòng)脈腦缺血再灌注模型，能更好的模擬人體腦梗死發(fā)病模式，使所檢測(cè)出來(lái)的各項(xiàng)指標(biāo)更加具有說(shuō)服力；2.腦缺血再灌注后可使大鼠出現(xiàn)行為學(xué)及形態(tài)學(xué)方面的損傷，使IL-6、凋亡細(xì)胞及STAT-3表達(dá)增多；3.缺血后處理可能的腦