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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究瑞舒伐他汀預(yù)處理對(duì)高脂血癥大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)功能損傷、STAT3、JAK2、TNF-α表達(dá)的影響。探討腦缺血預(yù)處理對(duì)缺血再灌注損傷時(shí)STAT3/JAK2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用,以及瑞舒伐他汀預(yù)處理腦保護(hù)作用的可能機(jī)制。
方法:制備高脂血癥大鼠模型:130只雄性SD大鼠隨機(jī)分為普通飼料喂養(yǎng)組(10只)和高脂飼料喂養(yǎng)組(120只),普通飼料喂養(yǎng)組以普通飼料自由喂養(yǎng),高脂飼料喂養(yǎng)組以高脂飼料自由喂養(yǎng),喂養(yǎng)28d后空腹
2、尾尖靜脈取血測(cè)定兩組大鼠血漿總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度膽固醇(LDL-C),高密度膽固醇(HDL-C)含量,比較存在明顯差異(P<0.05),即高血脂大鼠造模成功。隨機(jī)將造模成功的高脂血癥大鼠(120只)隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組(Sham)(30只)腦缺血再灌注模型組(IR)(30只),低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組(LRos)(30只)和高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組(HRos)(30只)。其中假手術(shù)組及腦缺血再灌注模型組一日一次給
3、予滅菌用蒸餾水(1.0mL/100g)灌胃,低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組(LRos)一日一次按瑞舒伐他汀0.5mg.kg-1搗碎后溶于相應(yīng)體積蒸餾水中灌胃,高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組(HRos)一日一次按瑞舒伐他汀4.0mg.kg-1搗碎后溶于相應(yīng)體積蒸餾水中灌胃。連續(xù)用藥兩周后除假手術(shù)組外的其他各組采用線栓法制備大鼠右大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。各模型組按腦缺血2h再灌注術(shù)后2h、6h、12h、24h、72h5個(gè)時(shí)間點(diǎn)分組,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只大鼠
4、,其中各模型組于缺血2h再灌注24h時(shí)間點(diǎn)多增加5只大鼠用于TTC染色計(jì)算腦梗死體積,干濕重法測(cè)定各組大鼠在不同時(shí)間點(diǎn)的腦組織含水量。通過(guò)神經(jīng)功能缺損評(píng)分判斷模型是否成功及各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能缺損情況。HE染色病理切片觀察不同時(shí)間點(diǎn)腦梗死組織病理改變。免疫組織化學(xué)檢測(cè)STAT3、JAK2、TNF-α免疫陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化。
結(jié)果:1.神經(jīng)功能缺損評(píng)分:假手術(shù)組無(wú)神經(jīng)功能障礙;腦缺血再灌注模型組、低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組及高
5、劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組均有不同程度的神經(jīng)功能障礙,但同時(shí)間點(diǎn)相比,高、低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組神經(jīng)功能缺損評(píng)分顯著高于腦缺血再灌注模型組(P<0.05);高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組與各時(shí)間點(diǎn)的低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組相比,腦缺血再灌注后神經(jīng)功能缺損評(píng)分升高(P<0.05)。2.STAT3、JAK2免疫陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá):假手術(shù)組未見(jiàn)STAT3、JAK2免疫陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá);腦缺血再灌注模型組、低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組及高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組在
6、缺血再灌注2h后在缺血側(cè)半暗帶區(qū)和缺血中心區(qū)可檢測(cè)到STAT3、JAK2的免疫陽(yáng)性細(xì)胞,其表達(dá)在再灌注24h達(dá)到高峰,72h后表達(dá)下調(diào);高、低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組與相同時(shí)間點(diǎn)腦缺血再灌注模型組相比免疫陽(yáng)細(xì)胞的表達(dá)明顯降低(P<0.01);高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組與相同時(shí)間點(diǎn)的低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組相比STAT3、JAK2免疫陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)明顯降低(P<0.05)。3.TNF-α免疫陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá):假手術(shù)組TNF-α有少量陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá);
7、腦缺血再灌注模型組、低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組及高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組在缺血再灌注2h時(shí)間點(diǎn)見(jiàn)TNF-α免疫陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),其主要分布在缺血半暗帶區(qū)及缺血中心區(qū),且隨時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)量增加,24h達(dá)高峰,72h后逐漸下降,表達(dá)顯著高于各時(shí)間點(diǎn)的假手術(shù)組(P<0.01);高、低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)腦缺血再灌注模型組相比TNF-α免疫陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)明顯減少(P<0.01);高劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)低劑量瑞舒伐他汀預(yù)處理組相
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