阿奇霉素、青蒿琥酯、乙酰螺旋霉素及配伍用藥體內(nèi)外抗弓形蟲作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察阿奇霉素、青蒿琥酯、乙酰螺旋霉素及配伍用藥體內(nèi)外抗弓形蟲作用的效果，探索治療弓形蟲病的有效藥物及方法，為臨床合理用藥提供科學(xué)的指導(dǎo)。 方法：體外試驗(yàn)：制取RH株弓形蟲速殖子腹水懸液，定量分裝到無菌細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，平均約2.5×104個(gè)蟲體/孔，以生理鹽水作空白對照組，不同濃度的阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯、阿奇霉素與乙酰螺旋霉素、阿奇霉素與青蒿琥酯以及乙酰螺旋霉素與青蒿琥酯配伍用藥為實(shí)驗(yàn)組；用形態(tài)學(xué)觀察、細(xì)胞計(jì)數(shù)法和

2、MTT(四甲基偶氮噻唑藍(lán))比色法測定各組藥物對體外弓形蟲的抑制和殺滅作用，分別計(jì)算相對抑制率，繪出藥物劑量效應(yīng)曲線。 體內(nèi)試驗(yàn)：建立小鼠急性弓形蟲病動(dòng)物模型；以單純藥物阿奇霉素(A組)、乙酰螺旋霉素(B組)和青蒿琥酯(C組)，配伍藥物阿奇霉素與青蒿琥酯(D組)，阿奇霉素與乙酰螺旋霉素(E組)以及青蒿琥酯與乙酰螺旋霉素(F組)作為治療實(shí)驗(yàn)組，同時(shí)設(shè)未治療模型為對照組(G組)。上述各治療組分別于感染后2h給藥，均首劑量加倍，1次/天

3、，連用7天。給藥后每天記錄各組實(shí)驗(yàn)小鼠的飲食、活動(dòng)及發(fā)病情況、死亡時(shí)間和死亡數(shù)，鏡檢死亡小鼠腹腔沖洗液弓形蟲體的形態(tài)與密度，比較觀察各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的存活天數(shù)，繪制小鼠的生存曲線。 結(jié)果：體外實(shí)驗(yàn)：(1)形態(tài)學(xué)觀察：藥物作用72h后，光鏡下觀察，各實(shí)驗(yàn)組(阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯、阿奇霉素與乙酰螺旋霉素、阿奇霉素與青蒿琥酯以及乙酰螺旋霉素與青蒿琥酯配伍用藥)蟲體形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯變化，納蟲泡數(shù)目較少；而空白對照組蟲體無明顯改

4、變，納蟲泡可見。(2)體外藥敏實(shí)驗(yàn)：藥物作用24h后，當(dāng)阿奇霉素濃度為0.2μg/mL及200μg/mL時(shí)，相對抑制率是35.7％和68.8％，乙酰螺旋霉素濃度為0.2μg/mL及200μg/mL時(shí)，相對抑制率僅僅為2.56％和8.25％，青蒿琥酯濃度為2.5μg/mL及2500μg/mL時(shí)，相對抑制率則為7.7％和51.0％；而乙酰螺旋霉素+青蒿琥酯配伍用藥濃度為2μg/mL+2.5μg/mL及2000μg/mL+2500μg/mL時(shí)

5、，相對抑制率分別是7.3％和46.3％。藥物劑量效應(yīng)曲線顯示，單純藥物及配伍用藥對蟲體的抑制作用，均隨著藥物濃度的逐漸加大而越來越強(qiáng)，其作用效果與藥物濃度呈正相關(guān)關(guān)系。 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：給藥后3天內(nèi)，各實(shí)驗(yàn)組及對照組小鼠均無明顯的異常表現(xiàn)，第4天，對照組(G組)和乙酰螺旋霉素治療組(B組)、乙酰螺旋霉素與青蒿琥酯配伍用藥治療組(F組)小鼠開始出現(xiàn)活動(dòng)度減弱、畏寒、嗜睡、毛發(fā)散亂等現(xiàn)象，并在第5天小鼠開始死亡。第6天，阿奇霉素與乙酰螺旋

6、霉素配伍用藥治療組(E組)、青蒿琥酯治療組(C組)小鼠開始死亡。第7天，阿奇霉素治療組(A組)、阿奇霉素和青蒿琥酯配伍用藥治療組(D組)小鼠開始死亡；而對照組(G組)小鼠第9天的時(shí)候全部死亡。乙酰螺旋霉素治療組(B組)最長存活時(shí)間為8天，其它各組小鼠從第4天至第7天出現(xiàn)輕微癥狀，第8天后逐漸明顯，最長存活天數(shù)為15天(見表8)。應(yīng)用Log—rank統(tǒng)計(jì)分析，各實(shí)驗(yàn)組與對照組存活天數(shù)相比，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。

7、結(jié)論:阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及配伍用藥對體內(nèi)外弓形蟲均有抗蟲效應(yīng)，其體外抗蟲效果與藥物濃度呈正相關(guān)關(guān)系，給藥治療后能明顯提高受染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的存活天數(shù)。 在常規(guī)治療量藥物濃度下，對弓形蟲的殺滅作用依次為阿奇霉素、阿奇霉素與青蒿琥酯配伍用藥、青蒿琥酯、阿奇霉素與乙酰螺旋霉素配伍用藥，乙酰螺旋霉素與青蒿琥酯配伍用藥，而乙酰螺旋霉素的效果最差。阿奇霉素、阿奇霉素與青蒿琥酯配伍聯(lián)用有望成為臨床上治療弓形蟲病的較佳侯選用藥。