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文檔簡介
1、研究目的:近年來,研究表明,細(xì)菌通過多種途徑加強自身抗藥性,包括分泌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶、碳青霉烯酶等多種酶類對抗生素進(jìn)行水解,通過基因突變改變藥物作用靶位,誘導(dǎo)膜孔蛋白缺失或移位導(dǎo)致抗菌藥物不能有效進(jìn)入細(xì)菌,不同菌株之間轉(zhuǎn)移耐藥基因抵抗藥效,或者通過固有的主動外排泵系統(tǒng)排出抗生素;這些不同的代謝途徑造成了全球性蔓延的細(xì)菌的抗生素耐藥現(xiàn)象。目前,多種臨床常見病原菌如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、大腸桿菌等均出現(xiàn)了氨基糖苷類、
2、青霉素、頭孢類抗生素單一耐藥株甚至多重耐藥菌株,且抗菌藥物的研發(fā)周期遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及耐藥菌株的出現(xiàn)速度,發(fā)現(xiàn)或篩選能夠增強藥物敏感性的化合物,是逆轉(zhuǎn)耐藥菌株耐藥性的簡便快捷的手段。具有高效抗瘧作用的青蒿琥酯,不僅能夠迅速控制重癥瘧疾,且能有效抗菌、抗炎和抗菌增敏。因此,本研究擬探索青蒿琥酯在獨立抗菌以及輔助抗菌方面的潛在藥用價值,通過檢測青蒿琥酯協(xié)同常用抗菌藥物如青霉素鈉/頭孢曲松鈉對多種臨床常見的革蘭陽性菌和革蘭陰性菌的抗菌作用,為有效降低臨
3、床病原菌耐藥性,降低醫(yī)院感染率提供實驗依據(jù)。
研究方法:選取6種病原菌如金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、志賀氏菌、銅綠假單胞菌ATCC27853和銅綠假單胞菌臨床分離株,聯(lián)合藥品選用青霉素鈉或頭孢曲松鈉,連續(xù)二倍稀釋法檢測青蒿琥酯在單獨或聯(lián)合用藥下,對各種臨床分離病原菌株的抑菌作用。實驗分組具體為:菌液對照組、青蒿琥酯組、青霉素鈉組、頭孢曲松鈉組、青蒿琥酯+青霉素鈉組和青蒿琥酯+頭孢曲松鈉組,給藥濃度設(shè)定為最低藥
4、物濃度的青蒿琥酯聯(lián)用低于MIC劑量的青霉素鈉或頭孢曲松鈉,通過測定6個實驗組的菌株動態(tài)生長曲線,評價青蒿琥酯體外的抗菌增敏效果;在此基礎(chǔ)上,選取銅綠假單胞菌ATCC27853菌株,在昆明種小鼠體內(nèi)檢測青蒿琥酯聯(lián)合頭孢曲松鈉的協(xié)同抗菌作用,通過腹腔注射銅綠假單胞菌ATCC27853和肌肉注射給藥,觀察受試小鼠生存狀況,測定細(xì)菌感染的最小致死量(MLD)和次一級致死劑量,以次一級致死劑量為依據(jù)建立銅綠假單胞菌ATCC27853感染小鼠模型,
5、通過檢測小鼠血液細(xì)菌數(shù)量,血清內(nèi)毒素(LPS)和細(xì)胞因子IL-17水平,評價體內(nèi)青蒿琥酯對頭孢曲松鈉抗菌增敏效果。
研究結(jié)果:青蒿琥酯體外單獨用藥時對6種病原菌均僅有微弱的抗菌作用,體外可明顯提高青霉素鈉對枯草芽孢桿菌和銅綠假單胞菌分離株的生長抑制效果,增強志賀氏菌、銅綠假單胞菌ATCC27853和銅綠假單胞菌臨床分離株對頭孢曲松鈉的敏感性;與青霉素鈉,頭孢曲松鈉聯(lián)用時,相比抗生素的單獨使用能夠明顯延緩細(xì)菌生長速度;青蒿琥酯聯(lián)
6、合頭孢曲松鈉體內(nèi)能協(xié)同降低小鼠血液細(xì)菌數(shù)量和血清LPS水平,升高血清IL-17水平,且協(xié)同效果均優(yōu)于青蒿琥酯或頭孢曲松鈉單獨使用的效果。
結(jié)論:青蒿琥酯能明顯增加金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、志賀氏菌、銅綠假單胞菌ATCC27853和銅綠假單胞菌臨床分離株對青霉素鈉和頭孢曲松鈉的敏感性,其中以青蒿琥酯聯(lián)合頭孢曲松鈉對銅綠假單胞菌的協(xié)同抑制作用最佳,青蒿琥酯聯(lián)合頭孢曲松鈉能夠顯著降低ATCC27853感染小鼠血液
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