青蒿琥酯對(duì)哮喘大鼠模型治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察核因子-КB（nuclear factor-КB，NF-КB）、Toll樣受體4（Toll like receptor 4,TLR4）在抗原致敏支氣管哮喘大鼠氣道重塑模型中的表達(dá)情況，運(yùn)用青蒿琥酯進(jìn)行干預(yù)，觀察NF-КB、TLR4表達(dá)的變化，探討TLR4—NF-КB信號(hào)傳導(dǎo)通路在氣道重塑的形成過程中的作用，以及青蒿琥酯對(duì)氣道高反應(yīng)性和氣道重塑的影響及其作用機(jī)制。 方法：將Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組，哮喘模型組，

2、地塞米松治療組，青蒿琥酯低劑量、中劑量、高劑量治療組等6組。采用卵白蛋白（OVA）致敏的方法制備哮喘大鼠氣道重塑模型。治療組采用霧化吸入的方式給藥治療。 在采集標(biāo)本后，進(jìn)行外周血白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和支氣管肺泡灌洗液（BALF）白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)；HE染色檢測肺組織病理形態(tài)學(xué)改變；并利用PowerLab系統(tǒng)記錄離體氣管螺旋條對(duì)乙酰膽堿的收縮反應(yīng)；采用免疫組織化學(xué)技術(shù)、RT-PCR技術(shù)檢測核因子NF-КB P65蛋白、TLR4-mRNA在哮

3、喘大鼠支氣管上皮的表達(dá)。 結(jié)果：哮喘模型組的外周血白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和支氣管肺泡灌洗液白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，其嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目明顯高于其他各組，地塞米松組和青蒿琥酯各組嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目與哮喘模型組比較明顯降低。 肺組織病理形態(tài)學(xué)檢測顯示哮喘模型組大鼠支氣管粘膜皺襞增多，肺泡隔增厚，氣道平滑肌的厚度明顯增加，粘膜下、管壁及肺泡間質(zhì)均見有大量嗜酸性粒細(xì)胞浸潤，管腔狹窄，有典型的氣道重塑表現(xiàn)；而地塞米松治療組及青蒿琥酯各組炎癥反應(yīng)明顯減

4、輕，粘膜結(jié)構(gòu)完整，無明顯的氣道重塑表現(xiàn)。 離體氣管螺旋條對(duì)乙酰膽堿的收縮反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示地塞米松組和青蒿琥酯中、高劑量組的氣管螺旋條對(duì)乙酰膽堿的收縮反應(yīng)明顯降低，與哮喘模型組比較，有顯著性差異。 免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測結(jié)果顯示哮喘模型組NF-КBp65的表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組及其他各組；經(jīng)過地塞米松、青蒿琥酯霧化吸入治療后，NF-КBp65的表達(dá)降低，以高劑量組療效最為明顯。 RT-PCR技術(shù)檢測結(jié)果顯示哮喘模型

5、組TLR4-mRNA的表達(dá)量明顯高于空白對(duì)照組及其他各組；經(jīng)過地塞米松、青蒿琥酯霧化吸入治療后，TLR4-mRNA的表達(dá)降低，以高劑量組療效最為明顯。 結(jié)論：在抗原致敏支氣管哮喘大鼠氣道重塑模型中，NF-КB P65蛋白、TLR4-mRNA表達(dá)均增高。霧化吸入青蒿琥酯對(duì)抗原致敏支氣管哮喘大鼠氣道重塑和氣道高反應(yīng)性有著的干預(yù)和治療的作用，能夠一定程度上抑制NF-КB P65蛋白、TLR4-mRNA在哮喘大鼠支氣管上皮的表達(dá)，干預(yù)T