黃綠青霉菌產(chǎn)毒影響因素的實(shí)驗(yàn)觀察.pdf

1、目的： 在實(shí)驗(yàn)室條件下觀察溫度、pH和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃綠青霉菌(PCV)產(chǎn)毒的影響，以及溫度、pH對(duì)黃綠青霉菌產(chǎn)毒的交互作用。 方法： 用察氏培養(yǎng)基培養(yǎng)黃綠青霉菌。黃綠青霉菌菌株購(gòu)自中科院微生物研究所。用實(shí)驗(yàn)法觀察單一因素如溫度、pH和培養(yǎng)時(shí)間對(duì)產(chǎn)毒量的影響，采用析因設(shè)計(jì)的方法觀察溫度、pH 對(duì)產(chǎn)毒的交互作用。溫度分為低溫(8℃)恒溫、高溫 (30℃) 恒溫以及8～30℃變溫三種情況，變溫培養(yǎng)方法為白天30℃，夜間8

2、℃。pH則是通過(guò)添加NaOH 和 HCl 溶液將培養(yǎng)基控制在pH為5.0、7.0和9.0。二氯甲烷提取樣品中的黃綠青霉毒素(CIT)。用高效液相色譜法檢測(cè)毒素含量。高效液相色譜柱為SiO<,2> (4.6mm×150mm，5μm)；流動(dòng)相為乙酸乙酯：正己烷(7∶3，V/V)；流速為1ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為383nm；分析時(shí)間10min。 結(jié)果： 1.單一因素對(duì)黃綠青霉菌產(chǎn)毒的影響 (1) 黃綠青霉菌在高溫(30

3、℃)恒溫條件下的產(chǎn)毒量為 231.02±9.33 μg/g 培養(yǎng)基；在低溫(8℃)恒溫條件下的產(chǎn)毒量為222.36±23.66μg/g 培養(yǎng)基；在變溫(8～30℃) 條件下的產(chǎn)毒量為 532.16±14.90μg/g 培養(yǎng)基；在變溫條件下的產(chǎn)毒量明顯高于高溫和低溫條件的產(chǎn)毒量(P<0.05)，高溫(30℃)恒溫條件下產(chǎn)毒量與低溫(8℃)恒溫?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。 (2)黃綠青霉菌在中性(pH=7.0)條件下的產(chǎn)毒量為23

4、1.02±9.33μg/g 培養(yǎng)基；在酸性(pH=5.0)條件下的產(chǎn)毒量為161.86±40.89μg/g培養(yǎng)基；在堿性(pH9.0)條件下的產(chǎn)毒量為202.00±50.59μg/g培養(yǎng)基；中性和堿性條件下產(chǎn)毒量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，且均高于酸性條件下的產(chǎn)毒量(P<0.05)。 (3)黃綠青霉菌培養(yǎng)5d的產(chǎn)毒量為87.06±6.32μg/g培養(yǎng)基；培養(yǎng)10d的產(chǎn)毒量為309.90±42.47μg/g 培養(yǎng)基；培養(yǎng)15d的

5、產(chǎn)毒量為236.38±34.78μg/g培養(yǎng)基；培養(yǎng)20d的產(chǎn)毒量為153.94±38.80μg/g培養(yǎng)基；結(jié)果顯示，CIT產(chǎn)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，在培養(yǎng)10d時(shí)達(dá)到最高(P<0.05)，其后隨時(shí)間延長(zhǎng)，產(chǎn)毒量反而下降。 2.溫度和pH對(duì)黃綠青霉菌產(chǎn)毒的交互作用 黃綠青霉菌在高溫、酸性條件下的產(chǎn)毒量為92.14±16.00μg/g培養(yǎng)基；在高溫、堿性條件下的產(chǎn)毒量為 234.76±70.79μg/g培養(yǎng)基；在低溫、

6、酸性條件下的產(chǎn)毒量為 101.70±5.57μg/g培養(yǎng)基；在低溫、堿性條件下的產(chǎn)毒量為91.02±26.70μg/g培養(yǎng)基；經(jīng)分析，溫度和pH對(duì)黃綠青霉菌產(chǎn)毒的影響存在交互作用(P<0.05)。 結(jié)論： 1.溫度、pH和生長(zhǎng)時(shí)間對(duì)黃綠青霉菌產(chǎn)毒有較大影響，尤其在變溫條件下、中性的環(huán)境中產(chǎn)毒量較高，培養(yǎng) 10d是黃綠青霉菌產(chǎn)毒量達(dá)到峰值。 2.溫度和pH對(duì)黃綠青霉菌的產(chǎn)毒有交互作用，在變溫、偏堿性的條件下，可促進(jìn)