布地奈德聯(lián)合細(xì)菌溶解產(chǎn)物對(duì)哮喘小鼠的治療作用及機(jī)制研究.pdf

1、第一章布地奈德霧化治療哮喘小鼠的機(jī)制研究
　　 目的：建立小鼠哮喘模型，觀察布地奈德霧化吸入對(duì)哮喘小鼠的治療作用，探討其對(duì)IFN-γ、IL-4、糖皮質(zhì)激素受體和核因子-κB的影響。
　　 方法：健康6～8周齡雄性BALB/c小鼠24只隨機(jī)分為3組：(1)空白對(duì)照組；(2)哮喘模型組；(3)布地奈德治療組(BUD組)；每組8只小鼠。模型組小鼠予以腹腔注射卵清蛋白和氫氧化鋁混懸液致敏以及卵清蛋白溶液霧化吸入激發(fā)，對(duì)照組小鼠腹

2、腔注射及激發(fā)均以生理鹽水代替，BUD組致敏后予以BUD霧化吸入治療。末次激發(fā)24小時(shí)后處死小鼠，取支氣管肺泡灌洗液(BALF)進(jìn)行嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞因子檢測(cè)，取肺組織行病理學(xué)檢查及免疫組化測(cè)糖皮質(zhì)激素受體(GR)和核因子-κB(NF-κB)。
　　 結(jié)果：(1)BALF中嗜酸粒細(xì)胞數(shù)：模型組(19.14±1.95×106/L)與對(duì)照組(2.0±1.35×106/L)相比顯著增加(P＜0.05)，而BUD組(10.57±1.62

3、×106/L)與模型組相比顯著減少(P＜0.05)；(2)肺組織病理改變：與對(duì)照組相比，模型組肺組織可見嗜酸粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，而BUD組經(jīng)治療后炎癥較模型組明顯減輕；(3)BALF中細(xì)胞因子水平：IFN-γ模型組(353.74±124.90pg/mL)與對(duì)照組(653.67±199.20pg/mL)相比顯著降低(P＜0.05)，BUD組(447.85±125.07pg/mL)與模型組相比顯著增高(P＜0.05)；IL-4模

4、型組(246.25±52.68pg/mL)與對(duì)照組(118.17±56.12pg/ml)相比顯著增高(P＜0.05)，BUD組(170.65±69.79pg/mL)與模型組相比IL-4顯著降低(P＜0.05)；IFN-γ/IL-4模型組(0.91±0.37)與對(duì)照組(6.81±3.33)相比顯著降低(P＜0.05)，BUD組(2.52±0.71)與模型組相比顯著增高(P＜0.05)；(4)免疫組化：GR陽(yáng)性細(xì)胞百分比模型組(11.86±

5、1.97)較對(duì)照組(39.21±2.78)明顯減少(P＜0.05)，BUD組(23.09±2.83)較模型組明顯增加(P＜0.05)；NF-κB陽(yáng)性細(xì)胞百分比模型組(27.79±2.47)較對(duì)照組(9.09±1.59)明顯增加(P＜0.05)，BUD組(17.95±1.86)較模型組明顯減少(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：小鼠哮喘模型制備成功，布地奈德對(duì)哮喘小鼠有很好的治療作用，其機(jī)制可能與其使IFN-γ增加、IL-4降低、上調(diào)

6、GR水平及抑制NF-κB的活性有關(guān)。
　　 第二章布地奈德聯(lián)合細(xì)菌溶解產(chǎn)物對(duì)哮喘小鼠的治療作用及機(jī)制
　　 目的：觀察布地奈德聯(lián)合細(xì)菌溶解產(chǎn)物(泛福舒，Broncho-Vaxom，BV)對(duì)哮喘小鼠的治療作用，探討細(xì)菌溶解產(chǎn)物聯(lián)合布地奈德治療哮喘是否具有優(yōu)越性及對(duì)細(xì)胞因子IFN-γ、IL-4的影響。
　　 方法：健康6～8周齡雄性BALB/c小鼠32只隨機(jī)分成4組，每組8只：(1)空白對(duì)照組；(2)哮喘模型組；(3

7、)布地奈德治療組；(4)布地奈德聯(lián)合細(xì)菌溶解產(chǎn)物治療組（BUD＋BV組）。模型組、對(duì)照組及BUD組小鼠處理方法同第一章，BUD＋BV組致敏后予以BUD霧化吸入＋BV口服聯(lián)合治療。于末次激發(fā)24小時(shí)后處死小鼠，收集右肺BALF測(cè)細(xì)胞因子水平以及嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，取左肺行病理學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：(1)BALF中嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)：模型組(19.14±1.95×106/L)與對(duì)照組(2.0±1.35×106/L)相比顯著增加(P＜0.05

8、)，BUD組(10.57±1.62×106/L)及BUD-BV組(3.93±1.62×106/L)與模型組相比均顯著減少(P＜0.05)，BUD-BV組與BUD組相比減少更顯著，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；(2)BALF中細(xì)胞因子水平：IFN-γ模型組(353.74±124.90pg/mL)與對(duì)照組(653.67±199.20pg/mL)相比顯著降低(P＜0.05)，BUD組(447.85±125.07pg/mL)與模型組

9、相比顯著增高(P＜0.05)，BUD-BV組(629.87±186.83pg/mL)與BUD組比較顯著增高(P＜0.05)，接近對(duì)照組水平；IL-4模型組(246.25±52.68pg/mL)與對(duì)照組(118.17±56.12pg/mL)相比顯著增高(P＜0.05)，BUD組(170.65±69.79pg/mL)及BUD＋BV組(134.78±46.79pg/mL)與模型組相比均顯著增高(P＜0.05)，BUD＋BV組與BUD組相比有所

10、降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；IFN-γ/IL-4模型組(0.91±0.37)與對(duì)照組(6.81±3.33)相比顯著降低(P＜0.05)，BUD組(2.52±0.71)與模型組相比顯著增高(P＜0.05)；BUD＋BV組(4.40±1.84)與BUD組相比顯著增高(P＜0.05)；(3)肺組織病理改變：與對(duì)照組相比，哮喘組肺組織可見嗜酸粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，BUD組經(jīng)治療后炎癥較哮喘組明顯減輕，BUD＋BV組與BU