海帶多糖L01抑制內(nèi)皮損傷大鼠血栓形成與對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：觀察海帶多糖對(duì)兩種內(nèi)皮細(xì)胞損傷大鼠模型血栓形成的情況，以及對(duì)體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響，為研究和開發(fā)新型抗血栓藥物提供理論和實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 方法：(1)體內(nèi)給藥對(duì)內(nèi)皮損傷大鼠動(dòng)靜脈環(huán)路血栓形成的影響。采用腎上腺素(Adr)法制備內(nèi)皮細(xì)胞損傷的大鼠模型。大鼠隨機(jī)分為7組，生理鹽水對(duì)照組，腹腔注射生理鹽水，每天2次，連續(xù)3d；阿司匹林高、中、低劑量組，分別腹腔注射不同濃度阿司匹林，給藥lh后皮下注射腎上腺素，每天2次，連續(xù)3

2、d；海帶多糖高、低劑量組，腹腔注射海帶多糖，給藥1h后皮下注射腎上腺素，每天2次，連續(xù)3d；腎上腺素模型組，皮下注射腎上腺素，每天3次，連續(xù)3d，各組于第四天制備動(dòng)靜脈環(huán)路前再次皮下注射腎上腺素。通過動(dòng)-靜脈環(huán)路法測(cè)定血栓濕重和血栓抑制率。(2)體內(nèi)給藥對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠腸系膜微循環(huán)變化的影響。大鼠隨機(jī)分為6組，生理鹽水對(duì)照組，股靜脈注射生理鹽水；內(nèi)毒素組，股靜脈注射內(nèi)毒素；阿司匹林高、低劑量組，股靜脈給予內(nèi)毒素后，注射不同濃度阿司匹林；

3、海帶多糖高、低劑量組，股靜脈給予內(nèi)毒素后，注射不同濃度海帶多糖。將腸系膜固定于微循環(huán)觀察盒中，觀測(cè)微血管內(nèi)血栓形成的時(shí)間，通過圖像分析系統(tǒng)記錄固定時(shí)間點(diǎn)的血流速度。(3)對(duì)體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞電鏡下超微結(jié)構(gòu)的影響。體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)在培養(yǎng)瓶中隨機(jī)分組，空白對(duì)照組、模型組、L01對(duì)照組、L01高劑量組、L01低劑量組，分別培養(yǎng)48h。取材、固定、脫水、浸透、包埋、切片及染色，制成超薄切片，電鏡下觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，并觀察各

4、細(xì)胞器是否有損傷。 結(jié)果：(1)體內(nèi)給藥對(duì)內(nèi)皮損傷大鼠動(dòng)靜脈環(huán)路血栓形成的影響。腎上腺素?fù)p傷模型中，與生理鹽水組比較，模型組血栓濕重明顯增加。與模型組比較，海帶多糖高劑量組(50mg/kg)和低劑量組(10mg/kg)均能降低大鼠血栓濕重，高劑量組血栓抑制率達(dá)57.5％。(2)體內(nèi)給藥對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠腸系膜微循環(huán)變化的影響。內(nèi)毒素?fù)p傷模型中，與生理鹽水組比較，模型組血栓形成時(shí)間加快，1h后流速減緩。而與模型組比較，海帶多糖高劑量

5、組(5mg/kg)和低劑量組(2.5mg&g)均能延長(zhǎng)血栓形成時(shí)間，在1h流速顯著高于模型組。(3)對(duì)體外培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞電鏡下各細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)的影響。腎上腺素模型組細(xì)胞核不規(guī)則，細(xì)胞間緊密連接，細(xì)胞間微絨毛減少、消失，線粒體(Mi)腫脹，嵴溶解消失，核旁溶酶體增多。海帶多糖對(duì)照組基本接近正常組，低劑量組損傷程度低于模型組，而高劑量組基本接近正常組。 結(jié)論：海帶多糖對(duì)腎上腺素和內(nèi)毒素制備的內(nèi)皮損傷大鼠模型中的血栓形成均有抑制作用，并