海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用.pdf

1、目的：建立腎上腺素直接損傷家兔股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的血栓模型，研究海帶多糖L01對腎上腺素致血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)損傷的干預(yù)作用，從VEC形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)和抗凝血功能兩方面探討海帶多糖L01對VEC的保護(hù)作用。
　　 方法：將實(shí)驗(yàn)家兔分成五組：生理鹽水組、腎上腺素組、海帶多糖低劑量組、海帶多糖高劑量組和依諾肝素組，通過插管于股動(dòng)脈游離段分別注入生理鹽水、生理鹽水-腎上腺素液、低劑量海帶多糖-腎上腺素液，高劑量海帶多糖-腎上腺素液和依諾肝素-

2、腎上腺素液，保留25min后，動(dòng)脈插管連接生物信號記錄系統(tǒng)(BL系統(tǒng))，觀察血壓曲線，當(dāng)曲線變?yōu)橹本€即為血栓形成，記錄血栓形成時(shí)間，以此來評估內(nèi)皮細(xì)胞抗凝血功能的改變。取與藥物接觸的股動(dòng)脈段，用4％多聚甲醛固定，切片HE染色，觀察血管內(nèi)皮層的完整情況，以此來評估內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷程度。同時(shí)將標(biāo)本作TF蛋白免疫組化，以未脫落棕色內(nèi)皮層長度與血管內(nèi)壁總長的比值表示內(nèi)皮細(xì)胞層的完整程度，以血管平均灰度值表示TF在內(nèi)皮層和內(nèi)皮下組織的表達(dá)情況，從

3、另一方面來評價(jià)內(nèi)皮細(xì)胞功能受損程度。
　　 結(jié)果：腎上腺素組(19.99±1.92min)血栓形成時(shí)間顯著短于其它各組(P＜0.01)，生理鹽水組血栓形成時(shí)間(57.38±3.85min)與依諾肝素組(54.69±4.35min)無明顯差別(P＞0.05)，海帶多糖低劑量組血栓形成時(shí)間(33.04±3.05min)較海帶多糖高劑量組(46.94±4.31min)明顯縮短(P＜0.01)。
　　 股動(dòng)脈血管內(nèi)皮HE染色病理

4、切片顯示，生理鹽水組內(nèi)皮層完整、光滑、無缺損。腎上腺素組有大段內(nèi)皮層脫落、缺失。低劑量海帶多糖組大體完整，局部有內(nèi)皮細(xì)胞脫落。海帶多糖高劑量組內(nèi)皮層完整，局部可見與皮下組織分離。依諾肝素組較完整，局部表面粗糙。
　　 股動(dòng)脈內(nèi)皮TF蛋白免疫組化顯示，腎上腺素組內(nèi)皮層以及內(nèi)皮下組織均被染成棕褐色；生理鹽水組內(nèi)皮層染色較淺，呈淺黃色，內(nèi)皮下組織基本無染色；依諾肝素組內(nèi)皮層染色較生理鹽水組較深，且內(nèi)皮下組織可見少量染色區(qū)域；低劑量海帶

5、多糖L01組其內(nèi)皮層被染成棕黃色，內(nèi)皮下組織亦有少量棕黃色染色區(qū)域；L01高劑量組內(nèi)皮層被染成淺黃色，且內(nèi)皮層下淡黃色染色區(qū)域較少。測量各組內(nèi)皮層平均灰度值顯示，腎上腺素組平均灰度值(41.12±10.12)較其它各組明顯減小(P＜0.01)，而海帶多糖低劑量組(68.75±13.21)與海帶多糖高劑量組(85.00±7.37)平均灰度值無顯著差別(P＞0.05)。病理圖像分析儀檢測內(nèi)皮層完整程度顯示，海帶多糖高劑量組(64.35±3.