多發(fā)性骨髓瘤1號和12號染色體短臂遺傳學異常及其預后意義研究.pdf

1、第一部分MM患者1號染色體短臂遺傳學異常特點及其預后意義
　　 [目的]:探討不同疾病狀態(tài)漿細胞腫瘤1p12、1p13.3、1p21.2和1p32.3位點的遺傳學異常特點以及各位點異常在MM患者中的預后意義;尋求適合1p臨床FISH檢測指標，更好地指導臨床診治;補充和完善MM患者分子遺傳學預后指標，為建立適合我國MM患者的預后分層標準和個體化治療體系提供依據。
　　 [方法]:應用定位于1p12、1p13.3、1p21.

2、2和1p32.3位點的FAM46C、AHCYL1、CDC14A和CDKN2C基因的BAC克隆制作位點特異性FISH探針對我院1999.8-2012.11確診的265例初診、90例復發(fā)/難治、56例緩解(≥PR) MM患者，5例原發(fā)性漿細胞白血病(pPCL)，7例繼發(fā)性漿細胞白血病(sPCL)，2例意義未明單克隆免疫球蛋白血癥(MGUS)患者純化的CD138+細胞行FISH檢測，分析各種疾病狀態(tài)患者1p各位點遺傳學異常的特點，并結合臨床和

3、生存資料，分析1p各位點異常和臨床指標的相關性及其對患者預后的影響。
　　 [結果]:
　　 (1)1p12、1p13.3、1p21.2和1p32.3位點在初治患者中的缺失率分別為13.0％、18.7％、20.8％和9.06％，復發(fā)/難治患者缺失率分別為16.7％、15.2％、23.3％和10.0％，兩組缺失率無明顯差異。5例pPCL和2例MGUS患者未檢測到上述位點缺失。sPCL患者上述位點缺失率分別為28.6％、42

4、.9％、57.1％和57.1％，高于初治患者(P=0.239，0.019，0.022，0.000)。部分MM患者存在上述位點擴增，1p各位點的擴增率分別為1p12:3.04％、1p13.3:2.60％、1p21.2:3.77％和1p32.3:4.15％，各位點的擴增率均明顯低于缺失率(P=0.000，0.000，0.000，0.021)。
　　 (2)230例初治患者同時檢測了1p四個位點，57例至少存在1個或1個以上位點的缺失

5、，總1p缺失率為24.8％，缺失一個、兩個、三個和四個位點的患者分別占26.3％、22.8％、35.1％和15.8％，其中大片段缺失（缺失兩個或以上位點）的患者占73.7％。1p四個位點的缺失細胞比例呈兩兩正相關關系(P值均=0.000)。同一患者不點位點可出現多種遺傳學異常組合，如:缺失和缺失、缺失和正常、擴增和正常、缺失和擴增、擴增和擴增。
　　 (3)臨床相關性分析顯示1p12、1p13.3、1p21.2、1p32.3缺失

6、和高LDH正相關(P=0.029，0.034，0.026，0.012)，1p21.2、1p32.3、1p13.3缺失和13q14缺失呈正相關(P=0.023，0.033，0.010)，1p12、1p13.3、1p21.2缺失和骨髓漿細胞比例升高呈正相關(P=0.009、0.003、0.001)，1p21.2、1p13.3和血β2微球蛋白升高呈正相關(P=0.019，0.042)。
　　 (4)沙利度胺組初治患者中，1p各位點缺失

7、患者PFS和OS時間均明顯縮短(P＜0.05)，硼替佐米組患者，1p各位點缺失和無缺失患者PFS和OS時間無明顯差異。硼替佐米能明顯改善1p各位點缺失患者的近期療效、明顯延長1p21.2和1p32.3缺失患者的PFS和OS時間（P均＜0.05）。
　　 (5)單因素分析顯示高LDH、17p缺失和復雜核型為影響沙利度胺組初治患者PFS和OS的因素，將上述指標和1p缺失（至少存在1個或以上位點1P缺失）共同構建COX回歸模型行多因素

8、分析，結果1p和17p缺失為影響PFS的獨立因素，而1p缺失為影響OS的獨立因素。
　　 (6)復發(fā)/難治沙利度胺組患者，1p21.2缺失患者PFS和OS明顯縮短(P=0.025，0.001)，1p13.3缺失患者OS明顯縮短(P=0.003)，硼替佐米不能改善1p21.2缺失患者的PFS時間(P=0.258)，但能明顯延長1p21.2缺失患者的OS時間(P=0.034)。
　　 (7)復發(fā)/難治患者組，單因素分析顯示高

9、LDH、髓外浸潤是影響PFS和OS的因素，多因素分析顯示1p21.2缺失和高LDH為影響PFS(P=0.024，0.001)和OS(P=0.019，0.019)的獨立因素，而1p13.3缺失并非影響PFS和OS的獨立因素。
　　 [結論]
　　 1.MM患者1號染色體短臂遺傳學異常具有復雜性和多樣化特點，以缺失為主，多表現為大片段缺失，少見擴增。
　　 2.不同疾病狀態(tài)(初治、復發(fā)/難治、CR/VGPR和PR)

10、MM患者1p各位點缺失率和缺失細胞比例無明顯差異，sPCL患者1p13.3、1p21.2和1p32.3位點缺失率明顯高于初治患者。1p四個位點缺失細胞比例呈明顯兩兩正相關。
　　 3.1p各位點缺失患者多伴13q14缺失(1p13.3、1p21.2、1p32.3)，高LDH(1p12、1p13.3、1p21.2、1p32.3)、骨髓漿細胞比例≥50％(1p12、1p13.3、1p21.2)和高血清β2微球蛋白(1p21.2、1p

11、13.3)。
　　 4.沙利度胺初治組，1p各位點缺失患者PFS和OS均明顯縮短。硼替佐米能改善1p21.2和1p32.3缺失患者的近期療效，延長PFS和OS，克服其預后不良。1p13.3和1p12缺失的患者，硼替佐米能提高其近期療效，至少部分延長這部分患者的PFS和OS。多因素分析顯示1p和17p缺失為影響本組患者PFS的獨立因素，而1p缺失為影響本組患者OS的唯一獨立因素。
　　 5.復發(fā)難治沙利度胺組患者中，1p2

12、1.2和1p13.3提示預后不良，硼替佐米能克服1p21.2缺失患者預后不良，多因素分析顯示1p21.2缺失和高LDH為影響本組患者PFS和OS的獨立因素，而1p13.3缺失并非PFS和OS的獨立影響因素。
　　 6.基于上述結果，對初治患者我們優(yōu)先推薦檢測1p21.2位點或1p21.2和1p32.3兩位點聯(lián)合檢測。復發(fā)/難治患者，我們優(yōu)先推薦檢測1p21.2位點。
　　 第二部分MM患者12p13.31位點的遺傳學異常

13、特點及其預后意義
　　 [目的]:探討不同疾病狀態(tài)漿細胞腫瘤12p13.31位點的遺傳學異常特點及其在多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者中的預后意義。進一步補充和完善MM患者分子遺傳學預后分層指標，為建立適合我國MM患者的預后分層標準和個體化治療體系提供依據。
　　 [方法]:應用定位于12p13.31位點的CD27基因的BAC克隆制作FISH（熒光原位雜交）探針，對我院1999.8-2012.11確診的265例初診、90例復發(fā)/

14、難治和64例治療緩解(≥PR) MM患者，6例pPCL、8例sPCL和2例MGUS患者純化的CD138+細胞行FISH檢測。缺失細胞比例≥10％為缺失陽性。分析各種疾病狀態(tài)患者12p13.31位點的遺傳學異常特點，并結合臨床和生存資料，分析12p13.31位點異常和臨床指標的相關性及其對預后的影響。
　　 [結果]:
　　 (1)初治患者12p13.31位點缺失率為10.9％，復發(fā)/難治患者14.4％，PR患者10.5％

15、，CR/VGPR患者5％， sPCL患者33.3％，8例pPCL和2例MGUS患者未檢測到該位點缺失。不同疾病狀態(tài)患者12p13.31位點缺失率無統(tǒng)計學差異(P值均≥0.05)。部分MM患者存在12p13.31位點擴增，初治患者擴增率為4.5％，復發(fā)/難治患者為11.1％，復發(fā)/難治患者擴增率高于初治患者(P=0.025)。
　　 (2)臨床相關性分析顯示初治患者12p13.31缺失和多項高腫瘤負荷的臨床指標呈正相關:Cr≥17

16、7μmol/L(P=0.038)、β2-mg≥5.5 mg/dL(P=0.007)、ISS-Ⅲ期(P=0.009)、IL-2(P=0.000)、IL-4(P=0.012)和IL-6(P=0.012)因子水平升高。
　　 (3)沙利度胺初治組患者，12p13.31缺失患者PFS（12±4.33）和OS（12±7.34:）較12p13.31陰性患者（PFS:23±2.36; OS:37.5±7.37）明顯更短(P=0.025，0.0

17、07)，硼替佐米組12p13.31缺失陽性和陰性患者PFS（14±5.06(:)24±5.46）和OS（23.5±3.75(:)54±18.35）無明顯差別(P=0.324，0.151)，25例12p13.31陽性患者，使用硼替佐米治療者中位PFS和OS分別為14±5.51和24±3.67個月，使用沙利度胺為基礎的治療者中位PFS和OS分別為12±4.32個月和12±7.34個月，兩種治療方案比較PFS和OS無顯著性差異(P=0.672

18、，0.411)，但25例12p13.31陽性患者中，硼替佐米組患者中位OS有所延長，獲得VGPR以上療效的患者比例更高(50％:23.1％)，我們認為硼替佐米可能部分延長這部分患者的OS時間和提高治療緩解率。
　　 (4)12p13.31缺失合并高LDH(≥220U/L)、高β2-MG(≥5.5 mg/dL)和病理性骨折患者，PFS和OS較單獨12p13.31缺失、單獨LDH或β2-MG升高或病理性骨折和無上述異常的患者更差，中

19、位PFS僅為1.0，12.0和1.0個月(P=0.000，0.026，0.000)，中位OS為2.0，23.5和1.0個月(P=0.000，0.001，0.001)。
　　 (5)沙利度胺組初治患者，復雜核型、LDH≥220 U/L、17p13缺失和12p13.31缺失的患者PFS(P=0.005，0.015，0.000，0.025)和OS(P=0.001，0.003，0.001，0.007)分別較無上述異常的患者縮短，多因素分

20、析顯示12p13.31缺失不是影響本組患者PFS和OS的獨立因素，而17p13缺失是影響該組患者PFS(HR.6.743，95.0％CI:2.055-22.123, P=0.002)和OS(HR:3.989,95.0％CI:1.218-13.06,P=0.022)的唯一獨立因素。未發(fā)現影響硼替佐米組患者PFS和OS的獨立因素。
　　 (6)復發(fā)/難治患者中，未發(fā)現和12p13.31缺失相關的臨床指標，生存分析顯示，沙利度胺組患者

21、，12p13.31缺失陽性患者中位PFS為4.5±2.619個月，較陰性患者（14±2.874）明顯縮短(P=0.009)，兩組患者OS無差別。硼替佐米組患者，12p13.31缺失陽性和陰性患者PFS和OS無明顯差別(P=0.244，0.510)。多因素分析顯示高LDH是影響復發(fā)/難治患者PFS的獨立因素，而髓外浸潤、高LDH是影響OS的獨立因素。
　　 (7)在初治MM患者中，未發(fā)現12p13.31擴增和臨床指標的相關性及其預

22、后意義。
　　 [結論]
　　 1.MM患者12p13.31位點既可出現缺失，也可出現擴增，以缺失為主，初治和復發(fā)/難治患者12p13.31位點缺失率無差別，但復發(fā)/難治患者12p13.31位點擴增率高于初治患者。
　　 2.12p13.31缺失和多項反映腫瘤負荷的臨床指標呈正相關:Cr≥177μmol/L、β2-mg≥5.5 mg/dL、ISS-Ⅲ期、IL-2、IL-4和IL-6因子水平升高。
　　 3

23、.沙利度胺組初治患者中，12p13.31缺失的患者PFS和OS較無缺失患者明顯更短，但多因素分析提示其并非影響PFS和OS的獨立因素，17p13缺失是影響本組患者PFS和OS的唯一獨立因素。
　　 4.12p13.31缺失伴β2-mg≥5.5 mg/dL、LDH≥220U/L和病理性骨折的患者預后較單獨12p13.31缺失、單獨LDH升高或病理性骨折和無上述異常的患者更差。
　　 5.復發(fā)/難治患者中，12p13.31缺