探討GGTI-2133對(duì)前列腺癌細(xì)胞的增殖、遷移、凋亡、化療敏感性的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的：
　　通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察GGTaseI酶抑制劑GGTI-2133對(duì)體外培養(yǎng)的人前列腺癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響，并檢測(cè)其在腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性上的影響，以及探討可能的機(jī)制；
　　方法：
　　第一部分：（1）體外培養(yǎng)人前列腺癌DU145細(xì)胞，建立細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停ǎ?）分別用不同濃度的 GGTI-2133干預(yù)培養(yǎng) DU145細(xì)胞相同的時(shí)間或者相同濃度GGTI-2133干預(yù)培養(yǎng)不同的時(shí)間，采用倒置光學(xué)顯微鏡觀察及應(yīng)用M

2、TT法檢測(cè)GGTI-2133對(duì)DU145細(xì)胞增殖的影響，并FACS法檢測(cè)不同濃度GGTI-2133干預(yù)培養(yǎng)DU145細(xì)胞24h后的細(xì)胞周期的情況，并計(jì)算細(xì)胞增殖指數(shù)PI值；（3）不同濃度GGTI-2133干預(yù)培養(yǎng)DU145細(xì)胞24h后，應(yīng)用TUNEL法檢測(cè)DU145細(xì)胞凋亡情況；（4）采用transwell chamber檢測(cè)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組DU145細(xì)胞的遷移情況；（5）應(yīng)用MTT法檢測(cè)單用及聯(lián)用GGTI-2133（5μmol/L）時(shí)阿

3、霉素對(duì)DU145細(xì)胞半抑制濃度IC50值。
　　第二部分：不同濃度的 GGTI-2133干預(yù)培養(yǎng)DU145細(xì)胞24h后：（1）應(yīng)用western blot檢測(cè)RALA-GTP、RALB-GTP、RALBP1、REPS2/POB1、TBK1、NF-κB蛋白的表達(dá)；（2）應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)Bcl-2、Bax基因的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　第一部分：（1）DU145細(xì)胞增殖受抑制，倒置光學(xué)顯微鏡觀察及MTT檢測(cè)結(jié)果顯示，隨著

4、GGTI-2133濃度（在5～20μmol/L范圍內(nèi)）的升高、作用時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞增殖受抑制情況愈明顯，且GGTI-2133能誘導(dǎo)DU145細(xì)胞周期G0/G1期阻滯，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖指數(shù)與對(duì)照組比較差異明顯（P<0.05）；（2）GGTI-2133能促進(jìn)DU145細(xì)胞凋亡，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率增高與對(duì)照比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；（3）實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞遷移受抑制，其遷移到transwell板下室面的細(xì)胞數(shù)（37±16.29）明顯少于對(duì)照

5、組（327±22.13），差異顯著（P<0.01）；（4）阿霉素單用時(shí)C50值為10.1190±0.1220，聯(lián)合GGTI-2133（5μmol/L）時(shí)IC50值為5.7600±0.0580，兩者比較差異顯著（P<0.05）
　　第二部分：（1）隨著 GGTI-2133濃度（在5～20μmol/L范圍內(nèi)）的升高， RALA-GTP、RALB-GTP、RALBP1、TBK1、NF-κB蛋白的表達(dá)量減少，而REPS2/POB1蛋白的表

6、達(dá)量則增加，均與對(duì)照組比較差異顯著（P<0.05）；（2）GGTI-2133可影響凋亡基因Bcl-2、Bax的表達(dá)，可使Bcl-2基因表達(dá)下調(diào)、Bax基因表達(dá)上調(diào)，且呈濃度依賴性。
　　結(jié)論：
　　1、一定的濃度和時(shí)間范圍內(nèi)，GGTI-2133能夠抑制體外培養(yǎng)的人前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并可提高阿霉素對(duì)人前列腺癌細(xì)胞化療敏感性；
　　2、GGTI-2133對(duì)人前列腺癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及化療藥物敏感性的