CD28mAb對小鼠病毒性心肌炎的治療作用及其對Th1-Th2平衡的影響.pdf

1、目的:探討CD28單克隆抗體（CD28mAb）對小鼠病毒性心肌炎（VMC）的治療作用及其對Th1/Th2平衡的影響。 方法:選用106只4～6周齡健康雄性BALB/c小鼠，隨機分為CD28mAb組16只、病毒組40只、IgG組40只及正常對照組10只。CD28mAb組、病毒組及IgG組小鼠腹腔接種TCID50為10-6/ml的Nancy株CVB3病毒液0．15ml，正常對照組小鼠腹腔接種不含病毒的等量Eagle氏液。CD28mA

2、b組和IgG組小鼠均于接種后6小時、72小時分別腹腔注射CD28mAb0．1mg/kg及IgG0．1mg/kg。接種病毒后第7天處死所有小鼠，摘眼球取外周血，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測外周血清中IL-2、IL-4及IFN-γ的含量，在無菌條件下取心臟，光鏡下觀察心肌病理變化并計算心肌病理積分，實時熒光定量PCR（RQ-PCR）法檢測心肌組織中CVB3、IL-2、IL-4及IFN-γ的mRNA表達(dá)。 結(jié)果: 1

3、．小鼠接種病毒后第3天陸續(xù)出現(xiàn)聳毛、懶動、拱背、進(jìn)食減少或精神不振、相互撕咬等異常表現(xiàn)，體重明顯下降。第3天始有小鼠死亡，第4～5天達(dá)高峰，6天后無死亡，且小鼠癥狀逐漸減輕。 2．小鼠VMC的發(fā)病率為100％，光鏡下可見心肌細(xì)胞變性、壞死和心肌纖維斷裂，大量炎細(xì)胞浸潤，呈現(xiàn)典型的病毒性心肌炎改變。 3．CD28mAb組小鼠的死亡率（50％）明顯低于病毒組小鼠（80％）及IgG組小鼠（77．5％），其心肌病理積分（5．25

4、±1．91）亦明顯低于病毒組小鼠（8．88±2．95）。 4．CD28mAb組小鼠心肌組織中CVB3mRNA的表達(dá)水平（0．51±1．80）低于病毒組小鼠（3．48±2．89）。 5．病毒組小鼠血清IFN-γ水平（196．30±16．89）明顯高于正常對照組（26．20±7．61）小鼠，而其IL-4水平（50．80±6．04）明顯低于正常對照組小鼠（146．50±21．27），兩組小鼠血清IL-2水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

5、 6．CD28mAb組小鼠血清IFN-γ水平（30．38±4．42）明顯低于病毒組小鼠（196．30±16．89），而其IL-4水平（116．04±31．05）明顯高于病毒組小鼠（50．80±6．04），兩組小鼠血清IL-2水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 7．病毒組小鼠心肌組織中IFN-γmRNA水平（61．29±68．24）明顯高于正常對照組（6．61±15．09）小鼠，兩組小鼠IL-2和IL-4mRNA水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

6、 8．CD28mAb組小鼠心肌組織中IL-4mRNA水平（137．3±196．38）明顯高于病毒組小鼠（1．38±1．69），兩組小鼠IFN-γ和IL-2mRNA水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論: 1．VMC小鼠急性期外周血IFN-γ水平升高，IL-4水平降低，心肌組織中IFN-γmRNA的表達(dá)上調(diào)，表明VMC小鼠急性期以Th1細(xì)胞反應(yīng)為主，存在Th1/Th2平衡的偏移。 2．CD28mAb可降低VMC小鼠死亡