纈沙坦對慢性病毒性心肌炎小鼠Th17-Treg免疫平衡的影響.pdf

1、心肌炎是威脅人類健康的常見疾病，是指心肌中有局限性或彌漫性的急性、亞急性或慢性的炎性病變可原發(fā)于心肌，也可是全身性疾病的一部分。病因有感染、理化因素、藥物等，最常見的是病毒性心肌炎(VMC)，其中又以腸道病毒，尤其是柯薩奇B病毒感染最多見。許多實(shí)驗(yàn)和臨床資料提示病毒性心肌炎、擴(kuò)張型心肌病(DCM)是一種疾病的兩個階段，VMC最終可轉(zhuǎn)化為DCM。
　　 目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)通過建立慢性病毒性心肌炎(CVMC)小鼠的動物實(shí)驗(yàn)

2、模型，觀察實(shí)驗(yàn)小鼠心臟結(jié)構(gòu)、心功能的變化及觀察慢性病毒性心肌炎小鼠外周血Th17和CD4+CD25+Treg細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子的檢測分析，以及探討拮抗RAAS系統(tǒng)藥物改變Th17/Treg平衡在慢性病毒性心肌炎的發(fā)生發(fā)展中的關(guān)系，以期為慢性病毒性心肌炎的心肌保護(hù)尋求更多更好的選擇。
　　 方法：
　　 選42只4周齡Balb/c健康雄性小鼠隨機(jī)分為正常對照組(n=6)、CVMC模型組(n=36)。CVMC模型組分別于

3、0、14、28d腹腔接種0.2、0.25、0.3 mlCVB3(TCID50：10-4/0.1ml)共3次，正常對照組小鼠同期腹腔注射等體積生理鹽水。42d時小鼠應(yīng)用彩色多普勒超聲顯像儀，行心臟超聲檢查；包括心率(HR)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVSD)、射血分?jǐn)?shù)(EF)。自42d起，纈沙坦干預(yù)組均按100 mg/(kg·d)灌胃給藥，每日1次，共28 d；CVMC對照組及正常對照組同予等體積生理鹽水灌胃。70

4、d時將所有小鼠使用無創(chuàng)血壓測量儀測定心率、收縮壓、舒張壓。稱重后摘眼球取血，ELISA法檢測其血清AMA的表達(dá)。摘取小鼠心臟及脾臟，脾臟中提取Treg和Th17淋巴細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測。心臟沿左室長軸分為兩部分，一半置入10％中性甲醛固定后行HE、Masson染色，另一半采用RealTime-PCR技術(shù)，檢測Treg及Th17在小鼠心臟中mRNA的表達(dá)。
　　 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)均用)χ-±s表示，多組均

5、數(shù)間比較采用單因素方差分析方法；兩組均數(shù)間比較采用LSD檢驗(yàn)方法；p<0.05，為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 各組小鼠血壓水平無顯著性差異P>0.05)。慢性VMC組小鼠心臟質(zhì)量/體質(zhì)量比(HW/BW)大于纈沙坦干預(yù)組和對照組(P<0.01)，慢性VMC組小鼠脾臟中Th17細(xì)胞的比例、IL-17、病理積分明顯高于纈沙坦組和對照組(P<0.01)，而CD4+CD25+Treg細(xì)胞的比例、Foxp3低于纈沙坦組和