抗心肌肌球蛋白抗體與慢性病毒性心肌炎小鼠心肌重構(gòu)的關(guān)系及卡托普利、氧化苦參堿的干預(yù)研究.pdf

1、目的：
　　 通過建立慢性病毒性心肌炎(CVMC)小鼠的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，觀察實(shí)驗(yàn)小鼠心臟結(jié)構(gòu)、心功能的變化及血清中抗心肌肌球蛋白抗體(AMA)的表達(dá)水平及其間相關(guān)性，探討抗心肌肌球蛋白抗體與CVMC小鼠心肌重構(gòu)的關(guān)系；比較卡托普利和氧化苦參堿對CVMC小鼠上述指標(biāo)的干預(yù)效果，以期為CVMC的心肌保護(hù)尋求更多更好的選擇。
　　 方法：
　　 將111只4周齡BALB/c健康雄性小鼠隨機(jī)分為6組：正常對照1組(1組)(

2、n=8)，正常對照2組（2組）(n=8)，慢性病毒性心肌炎1組（3組）(n=20)，慢性病毒性心肌炎2組（4組）(n=25)，卡托普利干預(yù)組（5組）(n=25)及氧化苦參堿干預(yù)組（6組）(n=25)。以柯薩奇病毒B3株(CVB3)重復(fù)增量腹腔注射3、4、5、6組小鼠(第0、14、28天，劑量分別為0.20、0.25、0.30mL)建立慢性病毒性心肌炎模型，正常對照組小鼠同期腹腔注射等體積生理鹽水。42天將1組、3組小鼠稱重后，每只腹腔注

3、射3％水合氯醛(0.01～0.015ml/g)，麻醉后通過心臟超聲測定實(shí)驗(yàn)小鼠心臟結(jié)構(gòu)參數(shù)，包括心率(HR)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVSD)、主動(dòng)脈血流峰值速度(Vp)，并計(jì)算射血分?jǐn)?shù)(EF)及左室縮短分?jǐn)?shù)(FS)，然后斷髓處死2組小鼠，行心肌苦味酸天狼猩紅染色評估慢性病毒性心肌炎模型制備情況。42天后，第5組小鼠給予卡托普利10Omg/kg·d，第6組小鼠給予氧化苦參堿100mg/kg·d，均灌胃給藥，每天

4、1次，共28天；第2組和第4組小鼠同期給予等體積生理鹽水灌胃。70天將所有小鼠麻醉后行心臟超聲檢查，指標(biāo)同前。檢查后摘眼球取血，斷髓處死小鼠，稱取小鼠心臟質(zhì)量，計(jì)算心臟體質(zhì)量比值(HW/BW)；分別以蘇木素.伊紅(HE)、苦味酸天狼猩紅行心肌組織及心肌膠原組織特異性染色，運(yùn)用圖像分析軟件計(jì)算心肌組織中膠原容積積分(CVF，％)；酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測實(shí)驗(yàn)小鼠血清中AMA的表達(dá)，以光密度值（OD值）>X+2s為陽性組，

5、性組，比較兩組實(shí)驗(yàn)小鼠心臟結(jié)構(gòu)參數(shù)的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.兩CVMC組小鼠的HW/BW、LVDD及LVSD較同期正常對照組增大，HR明顯增快，而Vp、FS及EF較正常組明顯降低。卡托普利干預(yù)組及氧化苦參堿干預(yù)組小鼠各項(xiàng)指標(biāo)均比CVMC2組明顯改善，而但兩干預(yù)組小鼠各項(xiàng)指標(biāo)相比無顯著差異。
　　 2.CVMC組小鼠心肌HE染色顯示心肌纖維排列疏松，間質(zhì)成纖維細(xì)胞明顯增生?？ㄍ衅绽深A(yù)組及氧化苦參堿干預(yù)組小

6、鼠心肌組織病理變化均比CVMC2組明顯改善。
　　 3.兩正常對照組小鼠苦味酸天狼猩紅染色心肌細(xì)胞間隙僅可見少量紅色纖細(xì)的膠原；同期CVMC小鼠心肌膠原明顯增生、變粗，并且將心肌細(xì)胞分割呈網(wǎng)篩狀。且其CVF較同期正常對照組小鼠明顯升高。而卡托普利于預(yù)組、氧化苦參堿干預(yù)組小鼠心肌CVF均較CVMC2組顯著降低，但二者之間卻無明顯差異。
　　 4.CVMC小鼠血清AMAOD值較正常對照2組明顯升高（P<0.01），卡托普利及

7、氧化苦參堿干預(yù)后，實(shí)驗(yàn)小鼠血清AMAOD值較CVMC明顯降低(P<0.05)，但兩干預(yù)組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5.血清AMA陽性組實(shí)驗(yàn)小鼠與AMA陰性組實(shí)驗(yàn)小鼠相比較，HW/BW、CVF明顯增高（P均<0.01），LVDD、LVSD明顯增大（P均<0.01），HR明顯增快(P<0.01)，Vp、FS及EF則明顯減小（P均<0.01）。
　　 6.血清AMA與HW/BW、CVF呈正相關(guān)(rnw/Bw=0.881，P

8、.01；rCVF=0.953，P<0.01)，與Vp、FS及EF呈負(fù)相關(guān)(rvp=0.818，P<0.01；rEF=0.743，P0.05;rLVSD=0.589,P>0.05;rHR=0.295,P>0.05).
　　 結(jié)論：
　　 1.根據(jù)心臟超聲、HW/BW、心肌組織病理變化及膠原測定結(jié)果，實(shí)驗(yàn)第42天

9、時(shí)，小鼠已具備慢性病毒性心肌炎的臨床及病理特征，說明此時(shí)慢性病毒性心肌炎小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭苽涑晒?，證實(shí)慢性病毒性心肌炎小鼠存在心肌重構(gòu)。
　　 2.慢性病毒性心肌炎小鼠血清AMA表達(dá)增高，與抗體陰性組相比，抗體陽性組HW/BW、CVF、LVDD、LVSD增加，Vp,EF、FS減少；隨著AMA表達(dá)的增高，HW/BW增加，CVF增高，Vp、EF、FS明顯減少，提示血清中AMA與慢性病毒性心肌炎小鼠心肌重構(gòu)有一定的關(guān)系。
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