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1、目的:研究在低氧預(yù)適應(yīng)時(shí)Notch-Jagged1信號(hào)通路對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞功能的影響及其機(jī)制。
方法:
第一部分,分離并培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞,將細(xì)胞分為兩組:
1.常氧+空白組;
2.低氧預(yù)適應(yīng)(3% O2,5% CO2和92% N2)+空白組。待細(xì)胞復(fù)氧24小時(shí)后,分別用Westernblot法和Quantitative RT-PCR法檢測(cè)各組細(xì)胞Jagged1蛋白及mRNA表達(dá);MTT法檢測(cè)內(nèi)皮祖細(xì)胞增
2、殖能力;ELISA法檢測(cè)上清液中NO及VEGF含量。
第二部分,分離并培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞,將細(xì)胞分為四組:
1.低氧預(yù)適應(yīng)+空白組;
2.低氧預(yù)適應(yīng)+Notch拮抗劑DAPT25μM組;
3.低氧預(yù)適應(yīng)+DAPT50μM組;
4.低氧預(yù)適應(yīng)+DAPT100μM組。待細(xì)胞復(fù)氧24小時(shí)后,檢測(cè)方法同第一部分。
結(jié)果:低氧預(yù)適應(yīng)處理內(nèi)皮祖細(xì)胞,相比常氧條件下內(nèi)皮祖細(xì)胞Jagged1蛋白及
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