阿托伐他汀抑制無血清和缺氧條件下對比劑誘導(dǎo)的人腎小管上皮細胞凋亡.pdf

1、目的:探討阿托伐他汀在無血清和缺氧條件下對比劑誘導(dǎo)人腎小管上皮細胞凋亡中的作用及機制。
　　方法:培養(yǎng)的人腎小管上皮細胞（HKC）在無血清和缺氧條件下分別與不同濃度（10、20、40、80、120、150mgI/ml）的碘海醇（非離子型低滲對比劑）共孵育2h；碘海醇（120mgI/ml）無血清和缺氧條件下干預(yù)HKC細胞0、1、2、4、8、12h。不同濃度阿托伐他?。?0-8、10-7、10-6、10-5mol/L）先與HKC細胞共

2、孵育12h后，碘海醇（120mgI/ml）無血清和缺氧條件下刺激2h和12h。CCK-8法檢測細胞增殖；流式AnnexinV-FITC/PI雙染檢測細胞凋亡；熒光顯微鏡檢測細胞內(nèi)ROS水平；Western-Blot檢測Bax、Bcl-2蛋白。
　　結(jié)果:在無血清和缺氧條件下碘海醇呈一定的濃度和時間依賴性誘導(dǎo)HKC細胞活性下降和凋亡。與正常情況下碘海醇干預(yù)細胞相比，無血清缺氧培養(yǎng)加重碘海醇對細胞的損傷，表現(xiàn)為細胞活性受到抑制增強（0

3、.474±0.060VS0.312±0.076，P<0.05，n=3），凋亡明顯增加（9.53％±1.19%VS18.83%±1.36%，P<0.05，n=3），細胞內(nèi)ROS產(chǎn)生增多，Bax蛋白上調(diào)增加（1.276±0.058VS1.468±0.076，P<0.05，n=4），Bcl-2蛋白表達下調(diào)增加（0.117±0.022VS0.067±0.009，P<0.05，n=4）。阿托伐他汀在10-8~10-6mol/L范圍內(nèi)呈濃度依賴性抑

4、制無血清和缺氧條件下碘海醇誘導(dǎo)的HKC細胞活性下降、凋亡、細胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生、Bax蛋白表達上調(diào)及Bcl-2蛋白表達下調(diào)。細胞內(nèi)ROS水平與Bax蛋白表達呈正相關(guān)，與Bcl-2蛋白表達呈負相關(guān)。
　　結(jié)論:無血清和缺氧條件下碘海醇呈濃度和時間依賴性誘導(dǎo)HKC細胞活性下降、凋亡，此作用與細胞內(nèi)氧化應(yīng)激及Bax蛋白表達上調(diào)、Bcl-2蛋白表達下調(diào)相關(guān)。阿托伐他汀在10-8~10-6mol/L范圍內(nèi)呈濃度依賴性抑制無血清和缺氧條件下碘海