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1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文抗HER2核酶對乳腺癌細(xì)胞的作用姓名:朱丹申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:盧光琇20070501ABSTRACTobiective:Toconstructtwoanti一期強(qiáng)2ribozymeptasmidsRzlandRz2;observetheireffectsonHel02expressionandthegrowthofMCF一7。akindofhumanbreastcancercells;anddis
2、cussthemechanismsaswell;嬲toconstructtheplatformofcanergenetherapywithsmallRNAtechniqueinourinstituteMethods:11”DNAsequencesofRzlandRz2woresynthesizedanddirectlyclonedintopcDNA31,aeukaryoticexpressionplasmid11leconstructe
3、dplasmidsRzpdⅪ4A31werethentransfectedintoMCF7cells11”consequenttestsweresemiquantitativeRPPC&reflectingmRNAquantityofl|匣R一2andothercancerrelatedimportantgenes;fluorescenceactivatedcellsorting(FACS)detectingHER2proteinexp
4、ression;andthetumorimplantationintonudemicenlestableRztransfectedcdlcloneswereinjectedsubcutaneouslyintonudemice。withthecontrolgroupinjectedwithuntreatedMCF7cellsnlegrowthrateandthevolumeoftumorweremeasnged蠡omoneweeklate
5、ronResults:NodistincteffectWasobservedOllRz248hoursafterthetransienttransfectionofI匕1decreaseinmRNAandproteinofHER2appearedwhichWasfurtherconfirmedinthestabletransfectedcetlclonesaccompaniedbythedecreaseofexpressionofsom
6、egenes,krasforexample,andtheincreaseofexpressionofothers。p53forinstanceInthetumorimplantationthegrowthrateofRzltransfectedcellswasfoundtobemuchlowerthanthatofthecontrolgroupandthetumorigenicitywasalsodecreasedConclusions
7、:Anti壬匝R■2ribozTmeRzlWasabletoinhibitHER2expressioninMCF7cellsn壕decreaseofkrasexpressionandincreaseofp53expressionWasobservedwhenHER2expressioninhibitedRzlalSeducedthetumorigenicityofNI(下7innudemiceKEYWORDSbreastcancerHE
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