靈芝三萜組分與紫杉醇聯合用藥對HER-2過表達的乳腺癌細胞增效作用研究.pdf

1、目的：本項目在預實驗發(fā)現靈芝三萜組分與紫杉醇對ErbB2過表達的乳腺癌細胞有協(xié)同抗增殖活性的基礎上，深入研究靈芝三萜組分對紫杉醇誘導乳腺癌細胞凋亡的體內外增效作用，為進一步開發(fā)我國傳統(tǒng)中藥材靈芝與紫杉醇聯合治療ErbB2過表達的乳腺癌提供臨床前實驗研究基礎。
　　方法：利用四甲基偶氮唑藍(MTT)法在體外檢測紫杉醇和靈芝三萜組分對HER-2過表達的細胞SKBR-3的增殖抑制作用。利用臺盼藍染色計數法在體外檢測紫杉醇和靈芝三萜組分對

2、HER-2過表達的細胞SK BR-3的增殖抑制作用。利用ComPusyn軟件分析靈芝三萜組分和紫杉醇對SKBR-3的協(xié)同作用。利用蛋白免疫印跡法檢測靈芝三萜組分、紫杉醇和兩者聯合用藥對HER-2、AKT、EGFR等相關蛋白通路的影響。通過體內動物實驗研究靈芝三萜組分和紫杉醇的聯合用藥對人乳腺癌細胞裸鼠移植瘤的抗腫瘤作用。提取動物實驗的瘤塊制成石蠟切片，利用免疫組化法觀察靈芝三萜組分和紫杉醇聯合用藥對HER-2蛋白的影響。
　　結果

3、：體外實驗表明，紫杉醇對HER-2過表達的SKBR-3細胞增殖有明顯的抑制作用，靈芝三萜組分對S K BR-3沒有明顯的細胞增殖抑制作用。當紫杉醇聯合靈芝三萜組分之后，對SKBR-3的增殖抑制作用明顯增強，效果比單用紫杉醇要好。靈芝三萜組分本身對SKBR-3的蛋白通路不產生影響。靈芝三萜組分能明顯增強紫杉醇對SKBR-3的細胞凋亡通路蛋白的表達作用，并增強PI3K-AKT通路的相關蛋白的阻斷作用。通過體內動物實驗，可以觀察到靈芝三萜組分