異丙酚對LPS誘導(dǎo)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞ACE的表達(dá)與活性的影響.pdf

1、目的: 在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(humanpulmonary microvascular endothelial cells，HPMVCs)損傷模型中，觀察異丙酚預(yù)處理對HPMVCs血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)活性和基因表達(dá)的影響，以及其對炎癥因子表達(dá)的調(diào)節(jié)，以探討異丙酚肺保護(hù)作用的可能機(jī)制。
　　方法: 以體外培養(yǎng)

2、的HPMVCs作為實驗對象，將細(xì)胞隨機(jī)分為四組(n=8):溶劑對照組（C組）、單純異丙酚處理組（P組）、LPS誘導(dǎo)組（L組）和異丙酚預(yù)處理組（P+L組）。各藥物終濃度:LPS5μg/ml，異丙酚50μM。按上述分組，異丙酚預(yù)處理組在加入LPS前1h加入異丙酚。各處理組細(xì)胞分別培養(yǎng)12h、24h、48h、72h后采用CCK-8法測細(xì)胞活力。細(xì)胞孵育12h后，采用改良分光光度法檢測各組培養(yǎng)液和細(xì)胞中的ACE活性，熒光定量PCR檢測ACE、T

3、NF-α、IL-1β和MCP-1 mRNA表達(dá)水平，同時用ELISA法測定細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α、IL-1β和MCP-1的蛋白含量。
　　結(jié)果: (1)各組細(xì)胞在各時間點的細(xì)胞活力無顯著性差異(P＞0.05);(2)與C組相比，P組各檢測指標(biāo)均無顯著性差別(P＞0.05); L組TNF-α、IL-1β和MCP-1的蛋白含量及基因表達(dá)水平均顯著升高，培養(yǎng)液中ACE活性增加，細(xì)胞ACE活性降低，ACE mRNA表達(dá)下調(diào)(P＜0.05)