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文檔簡介
1、目的:急性腦血管疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐漸上升趨勢,然其發(fā)病機制尚不十分清楚,因而缺乏相應的有效治療措施。本文旨在探討胡黃連苷II通過作用于線粒體細胞色素C(CytC)信號通路對腦缺血/再灌注損傷發(fā)揮神經保護作用的機制。
方法:成年健康雄性Wistar大鼠128只,按隨機數(shù)字表法分為假手術組、模型組、胡黃連苷II組、抑制劑組、抑制劑+胡黃連苷II組、激動劑組、激動劑+胡黃連苷II組、溶媒(DMSO)組。實驗選用CytC選擇性激動劑
2、蒼術苷(Atr)和特異性抑制劑環(huán)孢素(CsA)作為工具藥,胡黃連苷II作為治療藥物,采用改良Longa線栓法制備大鼠腦缺血2h/再灌注24h模型。大鼠腦缺血/再灌注24h后行改良神經功能學評分(mNSS);TTC染色法檢測大鼠腦梗死體積;HE染色法檢測大鼠神經細胞損傷情況;原位末端標記方法(TUNEL)檢測缺血/再灌注損傷后大鼠皮質區(qū)神經細胞凋亡的情況;電鏡觀察線粒體超微結構變化;ELISA法檢測大鼠缺血區(qū)腦組織活性氧(ROS)的含量;
3、免疫組織化學法和Western blot法檢測再灌注損傷區(qū)CytC、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達水平。
結果:與假手術組相比,模型組大鼠腦缺血/再灌注損傷后呈現(xiàn)出改良神經功能學評分升高,TTC染色示梗死區(qū)面積較明顯,HE結果顯示大鼠腦神經細胞損傷程度比較嚴重,TUNEL結果顯示神經細胞凋亡數(shù)量增加,線粒體結構破壞嚴重,ELISA法結果顯示大鼠腦組織中ROS含量升高;免疫組織化學和Western blot結果
4、顯示CytC、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達量均較假手術組升高(P<0.05)。與模型組相比,胡黃連苷II組大鼠mNSS神經學評分及腦梗死體積降低,HE結果顯示大鼠腦神經細胞損傷程度有所減輕,TUNEL結果示神經細胞凋亡數(shù)量減少,線粒體損傷減輕,腦組織中ROS含量下降;免疫組織化學和Western blot結果顯示CytC、Caspase-9和Caspase-3蛋白表達量均較模型組顯著降低(P<0.05)。CsA組與胡
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