米諾環(huán)素對(duì)大鼠脊髓損傷后線粒體細(xì)胞色素C釋放及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：探討sD大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后應(yīng)用米諾環(huán)素(minocycline)治療對(duì)線粒體細(xì)胞色素C(Cytocllrome C，Cyt-C)釋放及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。 方法：1.采用改良A11en’s wD法制作SCI模型：2．成年SD大鼠制備SCI模型后分為應(yīng)用米諾環(huán)素干預(yù)的治療組(A組)和應(yīng)用生理鹽水干預(yù)對(duì)照組(B組)，并于損傷后4h、8h、1d、3d、7d、14d不同時(shí)間點(diǎn)取材；3．H

2、E染色觀察SCI后脊髓組織病理變化；4．采用流式細(xì)胞儀磷脂結(jié)合蛋白V/碘化丙啶(Annexinv/PI)雙標(biāo)檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡；5．免疫組化染色檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞胞漿中Cyt-C表達(dá)陽性的神經(jīng)細(xì)胞：6.Basso-Beattie-Bresnahaan(BBB)運(yùn)動(dòng)評(píng)分術(shù)后動(dòng)物行為學(xué)觀察。 結(jié)果：1.HE染色鏡檢發(fā)現(xiàn)SCI后脊髓組織病理學(xué)改變A組明顯輕于B組；2．免疫組化染色A、B兩組均發(fā)現(xiàn)凋亡的神經(jīng)細(xì)胞以及胞漿中Cyt-C的陽性表達(dá)(呈

3、現(xiàn)棕褐色顆?；蚓鶆螯S染)，Cyt-C表達(dá)的陽性細(xì)胞率在各時(shí)間點(diǎn)上均B組>A組(P<0.01)；3．流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡百分率發(fā)現(xiàn)觀察A組在不同時(shí)間點(diǎn)上均有效減少細(xì)胞凋亡，保護(hù)幸存細(xì)胞，與B組相比較具有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，并在3d、7d時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞凋亡高峰處呈現(xiàn)顯著減少；4.BBB運(yùn)動(dòng)評(píng)分術(shù)后動(dòng)物行為學(xué)觀察顯示，脊髓損傷3d后與B組比較A組大鼠后肢的運(yùn)動(dòng)功能顯著增強(qiáng)，后肢反射的恢復(fù)加速。 結(jié)論：1.米諾環(huán)素可顯著