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文檔簡(jiǎn)介
1、蠶桑業(yè)在中國(guó)已有五千多年歷史,是中國(guó)乃至亞洲一項(xiàng)重要的經(jīng)濟(jì)產(chǎn)業(yè)。家蠶核型多角體病毒(BmNPV)感染帶來的的家蠶核型多角體病毒病是養(yǎng)蠶過程中比較常見的一類傳染性蠶病,感染的家蠶產(chǎn)絲量嚴(yán)重下降甚至死亡??茖W(xué)家已經(jīng)篩選并培育出多種對(duì)家蠶核型多角體病毒具有抗性的家蠶品種,并投入到蠶桑生產(chǎn)中。目前,已有許多關(guān)于家蠶與BmNPV感染、抗性的研究,主要研究方向?yàn)榧倚Q基因組學(xué)和家蠶蛋白質(zhì)組學(xué),也有學(xué)者將轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用到家蠶抗BmNPV品種的培育中。但
2、還未有報(bào)道從家蠶金屬蛋白組學(xué)方面探討家蠶對(duì)BmNPV的抗性機(jī)理。金屬蛋白組學(xué)是蛋白質(zhì)組學(xué)的重要組成部分,它主要研究與蛋白質(zhì)結(jié)合的金屬離子的功能以及其在生物體內(nèi)的分布定位。對(duì)金屬組學(xué)的研究通常需要特定的分離檢測(cè)方法,以完成金屬蛋白的定性定量分析。我們選取了BmNPV的高抗家蠶品種及其非抗性家蠶品種,通過桑葉將病毒喂食給家蠶,利用高效液相色譜和電感耦合等離子體質(zhì)譜,分離和檢測(cè)抗性、非抗性家蠶及喂食病毒后家蠶血液的差異金屬絡(luò)合物,試圖從金屬配
3、合物方面為家蠶抗BmNPV的研究提供一個(gè)新的突破口,同時(shí),為家蠶體內(nèi)金屬蛋白的分析研究提供更加簡(jiǎn)便有效的分離收集方法。我們的研究結(jié)果如下:
1.喂食病毒后的抗性和非抗性品種家蠶,Cu﹑Mn﹑Zn﹑Rb四種元素含量和連續(xù)六天的變化趨勢(shì)基本不變。非抗性家蠶血液中K、Ca、Mg、Fe和Ni五種元素在喂食BmNPV后的第三天的含量和趨勢(shì)出現(xiàn)明顯差異,抗性家蠶的K、Ca、Mg、Fe和Ni五種元素在喂食BmNPV后第五天差異明顯。
4、 2.利用篩選出的體積排阻色譜分離條件,運(yùn)用體積排阻色譜法(SEC)對(duì)四組家蠶血淋巴進(jìn)行了初步的分離檢測(cè)。結(jié)果表明,在喂食病毒后的第三天,未感染病毒的抗性和非抗性家蠶的SEC譜圖的8min峰差異明顯??剐约倚Q感染BmNPV后SEC圖譜中8min的其中一個(gè)峰檢測(cè)不到。在喂食病毒后第五天,感染BmNPV后的抗性家蠶的SEC圖譜的8min峰發(fā)生明顯改變。非抗性家蠶感染病毒后保留時(shí)間10~12min的其中兩個(gè)峰檢測(cè)不到。
3.比較分
5、析四組家蠶血淋巴的SEC-ICP-MS檢測(cè)圖,發(fā)現(xiàn)添食BmNPV后的第三天,與未感染BmNPV的非抗性家蠶相比,感染病毒后的非抗性家蠶血淋巴的SEC-ICP-MS圖譜的11min峰幾乎檢測(cè)不到。喂食BmNPV后的第五天,抗性、非抗性家蠶及其感染BmNPV后血淋巴的Mn、Zn和Cu元素的SEC-ICP-MS檢測(cè)圖都出現(xiàn)明顯差異。
4.利用葡聚糖G100凝膠柱對(duì)體積排阻色譜分離結(jié)果中的8min組分進(jìn)行了重點(diǎn)分離并收集分離組分。收集
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