家蠶有機磷農藥抗性的性別差異研究.pdf

1、家蠶(Bombyx mori)屬鱗翅目蠶蛾科昆蟲，起源于野生桑蠶，經(jīng)過長期的人工選擇，家蠶的產絲性能得到了大幅度的提高，但對不良環(huán)境的抵抗能力卻大大下降。家蠶由于對農藥的抗性弱，在蠶業(yè)生產中每年都造成大量的農藥中毒現(xiàn)象，成為制約蠶絲業(yè)健康發(fā)展的一個矛盾。為解決這一矛盾，蠶業(yè)領域許多單位都在致力于家蠶抗性相關的研究。
　　 昆蟲的性別與抗藥性的關系是近年來的研究熱點，我國作為一個養(yǎng)蠶大國，早在上世紀五六十年代就開始了專養(yǎng)雄蠶的試驗

2、，對雄蠶和雌蠶進行了許多飼養(yǎng)對比試驗，發(fā)現(xiàn)同一品種內雄蠶食桑少，葉絲轉化率、繭層率和出絲率都比雌蠶高。近半個世紀以來各國學者對蠶的性別控制進行了廣泛研究，雄蠶品種的育成，專養(yǎng)雄蠶技術的推廣是提高蠶繭生產效率、增加繭絲綢生產經(jīng)濟效益和高附加價值的突破，但由于缺少家蠶雌性個體作對照，沒有系統(tǒng)研究家蠶雌雄個體之間對農藥抗性的差異。本試驗采用家蠶卵色限性品種，該品種的性別可在卵期依據(jù)卵色進行分辨，判別率達100％，便于開展性別與抗藥性的研究。<

3、br>　　 為了研究家蠶性別和對辛硫磷農藥的抗性的關系，以家蠶卵色限性品種為實驗材料，采用浸葉法測定了家蠶雌雄個體各齡期對辛硫磷農藥的半致死劑量(LC50)。結果表明，各齡雄蠶個體對辛硫磷的LC50均高于雌性個體，1-5齡的雄蠶LC50分別為：407.811ng.mL-、1291.245ng.mL-2046.462ng.mL-1、3376.183ng.mL-、5428.747ng.mL-,分別是雌蠶的1.03、1.14、1.05、1.

4、05、1.07倍。其中2齡和5齡差異顯著。
　　 為了研究不同性別家蠶體內谷胱甘肽s-轉移酶(glutathione S-transferase，GST)、乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase，AChE)和羧酸酯酶(Carboxylesterase，CarE)的活性差異，本文以卵色限性家蠶品種各齡起蠶及5齡第3d的頭、中腸、脂肪體和絲腺等七種組織為實驗材料，參考Ellman的酶活測定方法，測定了三種酶的活性。結

5、果表明，三種酶的活性在雌雄家蠶個體間均存在明顯差異。GST活性測定結果表明，農藥誘導后雌雄家蠶個體的酶活性均明顯升高。家蠶組織中，頭部和脂肪體中該酶的活性最高，農藥誘導后雌雄脂肪體中的GST活性均受到明顯抑制，而在頭部則表現(xiàn)為雄性抑制，雌性上升，雌雄間差異顯著，推測GST在頭部的功能與性別存在一定的關聯(lián)。農藥誘導后家蠶脂肪體AChE的活性受抑制降低，而頭部卻有所上升。在中腸中，雄蠶活性降低，而雌蠶上升，雌雄間差異明顯，推測與不同性別家蠶

6、組織對辛硫磷的敏感性不同所致。CarE活性研究表明，農藥未誘導的家蠶頭部、絲腺、血液和馬氏管中的CarE活性顯著高于雄蠶。
　　 為了研究不同性別家蠶解毒酶基因的表達差異，本文采用實時熒光定量PCR法，比較研究雌雄家蠶體個體以及不同組織主要解毒相關酶基因的表達差異。結果表明，本文所選解毒酶基因在雌雄個體之間均存在明顯差異，GST和AChE的活性在雌雄間的差異與相應基因的表達規(guī)律一致；羧酸酯酶則表現(xiàn)為較高的基因表達量對應較低的酶活