2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:OX40/OX40L是一對重要的共刺激分子,主要作用在效應T細胞的晚期應答階段,表達高峰在T細胞接觸抗原后72-96h,對T細胞的長期存活,更多記憶T細胞的生成,刺激樹突狀細胞(Dendritic cell,DC)的分化成熟均有重要的作用。相關研究提示OX40/OX40L通路很可能在T細胞特異性免疫中發(fā)揮重要作用并在實體器官移植的免疫保護中具有潛在的臨床應用價值。本研究構建了含OX40基因siRNA片段的真核表達載體pRNAT-U

2、6.1/Neo。觀察活體應用siRNA技術干預OX40/OX40L通路對小鼠移植心臟的免疫保護作用。為進一步研究OX40/OX40L通路在移植免疫耐受中的作用和機制提供實驗依據(jù),并開啟一條新的誘導免疫耐受的途徑。
   方法:供體為C57/BL6J(H-2b),DBA/2(H-2d),受體為Balb/C(H-2d),均為雄性,SPF級,體重25~30g。根據(jù)不同品系的組合及模型建立后胸腺注射物的不同分為以下幾組:(1)主要組織相

3、容性復合體(MHC)不合(C57/BL6J→Balb/C):共72只,C57/BL6J和Balb/C各36只,把造模成功后的小鼠隨機分為3組,每組12只。Ⅰ生理鹽水空白對照組,ⅡpRNAT-CTL陰性對照組,ⅢpRNAT-OX40siRNA處理組。各組于手術后第1,第4天乙醚吸入麻醉后胸腺注射含有陽離子聚合物的溶液40μl。(2)次要組織相容性復合體(mHC)不合(DBA/2→Balb/C):共72只,DBA/2和Balb/C各36只,

4、把造模成功后的小鼠隨機分為3組,每組12只。Ⅳ生理鹽水空白對照組,Ⅴ pRNAT-CTL陰性對照組,Ⅵ pRNAT-OX40siRNA處理組。術后處理同(1)。觀察移植心臟和受體存活情況。術后第7天取移植心臟行病理學檢查,(2)組取血清檢測心肌酶譜,取脾臟行RT-PCR和Western Blot檢測OX40mRNA表達和OX40膜蛋白表達情況。
   結果:在C57/BL6J→Balb/C組合中(MHC不合),pRNAT-OX4

5、0siRNA組移植心臟生存時間較生理鹽水組和陰性對照組無明顯延長,移植心臟病理學檢查無明顯改善。而在DBA/2→Balb/C組合中(mHC不合),pRNAT-OX40siRNA組小鼠移植心臟生存時間較生理鹽水組和陰性對照組顯著延長,移植心臟中位生存時間大于100d。病理改變顯著減輕,心肌細胞間淋巴細胞,單核細胞浸潤明顯減少,心肌細胞未見壞死。乳酸脫氫酶(LDH)、谷草轉氨酶(AST)、肌鈣蛋白(Tn)以及脾臟OX40mRNA表達和OX4

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