曲尼司特局部注射抑制兔耳增生性瘢痕的實驗研究.pdf

1、瘢痕，尤其是病理性瘢痕(增生性瘢痕和瘢痕疙瘩)，給患者的身體和精神帶來嚴重損害，因此是整形乃至整個外科領(lǐng)域研究的重點。迄今為止，雖然有多種治療方法，但是缺乏一種可靠而有效的方法。目前藥物治療中最常用的是糖皮質(zhì)激素局部應(yīng)用。糖皮質(zhì)激素通過抑制成纖維細胞增殖及膠原合成、促進細胞凋亡對病理性瘢痕有明顯的療效，但長期應(yīng)用容易引起患者內(nèi)分泌紊亂，這一副作用使之在臨床上應(yīng)用時受到限制。尋找一種良好的病理性瘢痕治療的局部用藥一直是皮膚科和整形科醫(yī)師關(guān)

2、注的焦點曲尼司特(Tranilast，TNL)化學(xué)名為N-(3’，4’---二甲氧基肉桂酰)氨茴酸，臨床上常用于治療變態(tài)反應(yīng)性疾病。通過抑制肥大細胞和嗜堿細胞釋放化學(xué)介質(zhì)阻止變態(tài)反應(yīng)發(fā)生。近年來研究發(fā)現(xiàn)TNL在體外實驗中可抑制多種類型基質(zhì)成纖維細胞(如：眼、腎、肝、肺成纖維細胞)的增殖及膠原合成作用。在內(nèi)臟纖維化動物模型中經(jīng)口服給藥TNL可減緩內(nèi)臟纖維化疾病的程度，并認為作用機理可能與TGFβ1/Smad3細胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有關(guān)。

3、皮膚病理性瘢痕主要是皮膚創(chuàng)傷后細胞外基質(zhì)(ECM)異常沉積的結(jié)果，TNL是否可以通過抑制ECM沉著干預(yù)病理性瘢痕的預(yù)體外實驗：在體外培養(yǎng)的中華倉鼠的肺(V79)成纖維細胞及人皮膚增生性瘢痕原代培養(yǎng)的成纖維細胞(HF)中，觀察不同濃度的TNL對其增殖活性的影響。用血小板衍生生長因子(PDGF)刺激HF細胞，提高細胞增殖活性，觀察TNL對HF細胞增殖活性的影響。用MYT法測定干預(yù)后細胞增殖活性，逆轉(zhuǎn)錄PCR方法測定TGF β1、Smad3、

4、Smad7的表達情況。 體內(nèi)實驗：建立兔耳增生性瘢痕模型。在模型中采用測量瘢痕厚度變化、HE染色、苦味酸．天狼星紅染色、Ⅰ/Ⅲ膠原含量測定，觀察TNL混懸液局部注射對瘢痕形成的影響。 研究結(jié)果:TNL能有效地抑制體外培養(yǎng)的V79細胞的增殖活性，其作用呈量效依賴關(guān)系。TNL對原代培養(yǎng)的HF細胞增殖活性無明顯影響。在PDGF刺激后HF細胞增殖活性明顯提高，TNL可以抑制PDGF誘導(dǎo)后的HF細胞的增殖活性。TNL能有效地抑制H

5、F細胞TGFβ1、Smad3的表達水平，其抑制作用呈明顯的量效關(guān)系。HF細胞中Smad7無表達，TNL對其表達水平無影響。TNL羧甲基纖維素鈉混懸液(CMC-Na)局部注射兔耳增生性瘢痕可抑制瘢痕增生程度，但并不影響瘢痕的消退程度。HE染色及苦昧酸．天狼星染色發(fā)現(xiàn)TNL能降低細胞外膠原含量，降低Ⅰ/Ⅲ型膠原比例。 研究結(jié)論:體外培養(yǎng)的HF及V79細胞、兔耳增生性瘢痕動物模型均可作為研究組織纖維化疾病的治療和探索其機理的良好平臺。