手掌參醇提物對(duì)染矽塵大鼠肺組織NF-κB、a-SMA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：闡明手掌參醇提物（GcAe）對(duì)染矽塵大鼠不同時(shí)間點(diǎn)肺組織NF-κB、α-SMA和血清NF-κB、TGF-β1表達(dá)以及Ⅰ、Ⅲ型膠原合成的影響，探討GcAe對(duì)矽肺的可能作用機(jī)制。
　　 方法：本實(shí)驗(yàn)選用SPF級(jí)近交群雄性Wistar大鼠128只，隨機(jī)將大鼠分為4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組32只，即對(duì)照組（氣管內(nèi)注入0.9％NaCl）、染矽塵組、手掌參組（模型治療組）和漢防己組（標(biāo)準(zhǔn)藥物治療組）。
　　 各組均采用氣管暴露法，對(duì)照組

2、每只大鼠氣管內(nèi)注入1ml0.9％NaCl注射液，染矽塵組與各治療組注入1ml濃度為50mg/ml的矽塵滅菌混懸液。建模后第二天，手掌參組按手掌參醇提物0.8g/100g的量每天灌胃；漢防己（TT）組按漢防己甲素（TT）液5mg/100g的量隔天灌胃；對(duì)照組、染矽塵組給予蒸餾水2ml每天灌胃，如此直到將動(dòng)物處死。模型建立后于7d、14d、21d和28d的4個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取8只大鼠處死。計(jì)算肺臟器系數(shù)，用肺組織普通石蠟切片HE染色觀察大鼠肺組

3、織矽結(jié)節(jié)。用免疫組織化學(xué)SP法觀察NF-κB、α-SMA的表達(dá)，ELISA檢測(cè)血清NF-κB、TGF-β1含量，天狼猩紅染色法結(jié)合偏振光顯微鏡觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原。應(yīng)用Image-Pro Plus Version4.5 for windowsTM圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。
　　 結(jié)果：1、肺組織HE染色結(jié)果證實(shí)氣管暴露法成功建立矽肺大鼠模型。
　　 2、染矽塵組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺臟器系數(shù)均高于對(duì)照組，在7d、14d、21d、28

4、d有顯著性差異。與染矽塵組比較，GcAE組肺臟器系數(shù)在14d、21d、28d時(shí)顯著降低，差異有顯著性，TT組在14d、28d時(shí)顯著降低，差異有顯著性。
　　 3、手掌參對(duì)染矽塵大鼠Ⅰ、Ⅲ型膠原合成的影響。與對(duì)照組比較，染矽塵組、手掌參組和漢防己組各時(shí)間點(diǎn)Ⅰ型膠原面積百分比均高于對(duì)照組，差異有顯著性；與染矽塵組比較，手掌參組和漢防己組各時(shí)間點(diǎn)Ⅰ型膠原面積百分比明顯低于染矽塵組，差異有顯著性；與對(duì)照組比較，染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)Ⅲ型膠原面

5、積百分比均高于對(duì)照組，差異有顯著性：與染矽塵組比較，手掌參組和漢防己組各時(shí)間點(diǎn)Ⅲ型膠原面積百分比均低于染矽塵組，手掌參組14d、21d差異有顯著性，漢防己組14d、21d、28d差異有顯著性。
　　 4、染矽塵大鼠在7d、14d肺組織NF-κB表達(dá)情況。與對(duì)照組比較，染矽塵組、GcAE組及TT組肺組織NF-κB積分光密度均升高，差異有顯著性；與染矽塵組比較，GcAE組及TT組NF-κB積分光密度均降低，差異有顯著性。
　　

6、 5、染矽塵大鼠在7d、14d肺組織α-SMA表達(dá)情況。與對(duì)照組比較，染矽塵組、GcAE組及TT組肺組織α-SMA積分光密度均升高；差異有顯著性；與染矽塵組比較，GcAE組及TT組均明顯低于染矽塵組，差異有顯著性。
　　 6、染矽塵大鼠在各時(shí)間點(diǎn)血清NF-κB表達(dá)情況。與對(duì)照組比較，染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)血清NF-κB表達(dá)水平均升高，差異有顯著性；手掌參組、漢防己組與對(duì)照組比較均高于對(duì)照組；與染矽塵組比較，明顯低于染矽塵組，7d、2

7、8d差異有顯著性；
　　 7、染矽塵大鼠在各時(shí)間點(diǎn)血清TGF-β1表達(dá)情況。與對(duì)照組比較，染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)血清TGF-β1表達(dá)水平均升高，14d、21d、28d差異有顯著性；漢防己組、手掌參組與對(duì)照組比較，7d時(shí)低于對(duì)照組，14d、21d、28d均高于對(duì)照組，差異無(wú)顯著性。與染矽塵組比較，各時(shí)間點(diǎn)均低于染矽塵組，漢防己組在7d差異有顯著性，手掌參組在21d差異有顯著性；
　　 結(jié)論：
　　 1、手掌參醇提物可以明

8、顯降低染矽塵大鼠模型肺臟器系數(shù)增加。
　　 2、手掌參醇提物對(duì)矽塵誘導(dǎo)大鼠肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原合成具有抑制作用。
　　 3、在矽肺的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，NF-κB、α-SMA、TGF-β1表達(dá)與纖維化階段Ⅰ、Ⅲ型膠原的合成密切相關(guān)，故染矽塵大鼠肺組織各時(shí)間點(diǎn)NF-κB、α-SMA表達(dá)增加，血清NF-κB、TGF-β1水平升高，可能在矽肺纖維化形成過(guò)程中起著重要作用。手掌參醇提物能夠抑制矽塵誘導(dǎo)大鼠肺組織NF-κB、α-SMA蛋