COX-2抑制劑對高氧新生大鼠肺組織保護機制和肺組織AQP-1、NF-κB表達的影響.pdf

1、目的：
　　1.建立新生Sprague Dawley(SD)大鼠高氧肺損傷動物模型，觀察新生大鼠肺組織結構的病理改變；
　　2.比較高氧肺損傷時水通道蛋白-1（AQP-1）、核轉錄因子kappa B(NF-κB)的表達變化趨勢，探討AQP-1、NF-κB在肺損傷發(fā)病機制中的作用；
　　3.探討環(huán)氧合酶2（COX-2）抑制劑塞來昔布干預后是否對高氧誘導的肺組織損傷有保護作用，為防治高氧環(huán)境下的肺損傷提供依據(jù)。
　　

2、方法：
　　1.建立新生大鼠高氧肺損傷的動物模型：將出生一天內的新生SD大鼠（雌雄不限）105只隨機分為三組（n=35）：Ⅰ組：空氣組（空氣+腹腔注射DMSO）；II組：高氧組（85%氧氣+腹腔注射DMSO）；Ⅲ組：塞來昔布干預組（85%氧氣+腹腔注射塞來昔布）。
　　2.Ⅰ組新生大鼠自由呼吸空氣飼養(yǎng)，每天固定時間點注射DMSO（5ml/kg）。Ⅱ組、Ⅲ組新生大鼠置于密閉85%高氧箱中飼養(yǎng)。Ⅱ組于實驗第一天起每天固定時間點腹

3、腔注射DMSO（5ml/kg）。Ⅲ組于實驗第一天起同一時間點腹腔注射塞來昔布5mg/kg。
　　3.分別在實驗第3d、7d、14d各組隨機抓取8只大鼠并處死，取肺組織標本檢測下列指標：
　　（1）右下肺組織行蘇木精-伊紅（HE）染色觀察其病理學變化；
　?。?）右中上肺組織一部分應用免疫組化染色法觀察肺組織中AQP-1、NF-κB含量，另一部分應用凋亡染色法觀察肺組織細胞生長發(fā)育情況。
　　結果：
　　1.

4、各組大鼠實驗期間一般情況：Ⅰ組（空氣組）中的實驗大鼠反應良好，生長發(fā)育正常，無死亡現(xiàn)象。Ⅱ組（高氧組）中的實驗大鼠逐漸出現(xiàn)癥狀，表現(xiàn)為精神萎靡，反應遲鈍，活動量明顯減少，脫氧后呼吸困難，煩躁不安明顯，實驗期間死亡4只。Ⅲ組（干預組）中的實驗大鼠一般情況較高氧組明顯改善，實驗期間死亡1只。
　　2.肺組織病理學改變：Ⅰ組（空氣組）實驗大鼠各時間點肺組織肺泡大小均一，結構完整，肺泡腔內未見滲液及炎癥細胞浸潤。Ⅱ組（高氧組）實驗大鼠在高

5、氧暴露3d后出現(xiàn)液性滲出，可見有肺毛細血管擴張，肺泡腔擴大，腔內可見炎性細胞浸潤。7d后肺泡腔內可見出血，液體滲出較多，炎癥細胞浸潤較3d時明顯加重，肺組織結構紊亂，部分肺泡細胞破壞并出現(xiàn)肺大泡。14d時肺組織結構破壞更為明顯，肺泡—毛細血管膜、肺間隔明顯增厚，成纖維細胞增生出現(xiàn)纖維化表現(xiàn)。Ⅲ組（干預組）各時相肺組織形態(tài)學改變均較高氧組明顯改善。
　　3.肺組織AQP-1、NF-κB蛋白的表達：各時相點高氧組（Ⅱ組）實驗大鼠同空氣

6、組（Ⅰ組）實驗大鼠相比，肺組織AQP-1蛋白表達水平明顯下降（P＜0.01），NF-κB蛋白表達水平明顯升高（P＜0.01），塞來昔布干預組（Ⅲ組）實驗大鼠肺組織AQP-1蛋白表達水平較高氧組（Ⅱ組）明顯增加（P＜0.01），NF-κB蛋白表達較高氧組（Ⅱ組）明顯減少（P＜0.01）。
　　4.肺組織在空氣組、高氧組、干預組肺泡細胞凋亡的變化：在各時相點，高氧組（Ⅱ組）實驗大鼠同空氣組（Ⅰ組）實驗大鼠相比，肺組織細胞凋亡數(shù)明顯增加

7、（P＜0.01），塞來昔布干預組（Ⅲ組）實驗大鼠肺組織細胞凋亡數(shù)較高氧組（Ⅱ組）明顯減少（P＜0.01）。
　　結論：
　　1.長時間吸入高濃度氧氣可致新生大鼠發(fā)生肺損傷，表現(xiàn)為肺泡內炎性液體滲出及炎癥細胞浸潤；肺組織結構紊亂，肺泡-毛細血管膜、肺間隔明顯增厚，成纖維細胞增生等。
　　2.高氧肺損傷時，AQP-1蛋白表達水平較空氣組明顯下降，提示在高氧肺損傷時可能有肺泡上皮細胞膜受損或功能障礙；NF-κB蛋白表達水平較