DHPLC法檢測人類胃癌組織中EphB2基因的突變.pdf

1、胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，在我國人群中的發(fā)病率和死亡率均占第一位。胃癌的發(fā)生和發(fā)展是一個包含癌基因激活和抑癌基因失活，伴有端粒酶活化及遺傳不穩(wěn)定性的多基因、多階段的復(fù)雜的過程。在這個過程中，基因的突變是重要的作用機制之一。Eph(erythropoietin-producing hepatoma amplified sequence)家族是人類基因組最大的酪氨酸蛋白激酶受體家族，有14種人類Eph受體酪氨酸激酶，在人體內(nèi)具有重要的

2、功能。有研究表明，EphB2基因在胃癌、乳腺癌等腫瘤中表達上升，說明EphB2與這些腫瘤的發(fā)生與演進有重要聯(lián)系。但是，Huusko P等最近發(fā)現(xiàn)前列腺癌DU-145細胞系(一種來源于前列腺腦轉(zhuǎn)移灶的細胞系)中EphB2基因發(fā)生突變并且存在等位基因缺失，而且在使用野生型EphB2基因轉(zhuǎn)染DU-145前列腺癌細胞系后，癌癥細胞形成無性系細胞的生長可以被抑制，提示野生型EphB2基因可能有抑制腫瘤發(fā)生的作用。目前，EphB2基因在腫瘤發(fā)生和演

3、進的過程中發(fā)揮作用的分子機制尚不清楚。變性高效液相色譜(Denaturing High Performance Liquid Chromatography，DHPLC)是一種新的高通量篩選DNA序列變異的技術(shù)。其原理是用離子對反向高效液相色譜法分離并檢測異源雙鏈。該方法具有自動化、快速、檢出率高、檢出DNA片段大小范圍廣等優(yōu)點。目前這項技術(shù)已用于基因序列的比較、人類基因多態(tài)性及疾病相關(guān)性的研究。其重要特點有：1)快速分離DNA分子，一般