盲腸結(jié)扎穿孔膿毒癥致急性肺損傷大鼠肺泡巨噬細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞變化及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)采用盲腸結(jié)扎穿孔膿毒癥致急性肺損傷模型，動(dòng)態(tài)觀察膿毒癥大鼠早期肺泡巨噬細(xì)胞變化與肺臟血管內(nèi)皮細(xì)胞損害情況，初步探討兩者是否具有一定的相關(guān)性及其可能機(jī)理。
　　 方法：SD大鼠66只，雌雄不拘，隨機(jī)分為3組：（1）正常對(duì)照組（n=6），動(dòng)物于麻醉后，稱重，經(jīng)腹主動(dòng)脈采血，采用酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)血清E-選擇素，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。大鼠處死，分離雙肺，反復(fù)沖洗肺泡3次，收集肺泡灌洗液，采用酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定

2、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α（MIP-1α）水平，采取少許肺中葉組織行電鏡觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞（VEC）和肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞（ATⅡ）損傷情況，用電子秤稱量肺臟濕重，于80℃烤箱留存48h后，稱量肺臟干重。并計(jì)算肺濕重/干重（W/D）、肺系數(shù)、肺水含量；（2）假手術(shù)組（n=30），動(dòng)物麻醉后行盲腸探查術(shù)后關(guān)閉腹腔，分別于術(shù)后3h,9h,24h,36h和48h五時(shí)點(diǎn)行與正常對(duì)照組相同的操作步驟，每時(shí)相點(diǎn)6只大鼠；（3）膿毒癥組(n=30)，動(dòng)物行盲腸

3、結(jié)扎穿孔（CLP）術(shù)后3h,9h,24h,36h和48h五時(shí)點(diǎn)行與正常對(duì)照組相同的操作步驟，每時(shí)相點(diǎn)6只大鼠。
　　 結(jié)果：1.膿毒癥組在CLP術(shù)后3h肺泡灌洗液MIP-1α水平即升高，與正常對(duì)照組和假手術(shù)組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），且逐步升高，在24h達(dá)峰值（1.45±0.34 ng/ml），在36h時(shí)點(diǎn)有下降表現(xiàn)，但仍高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組（p<0.05）。2.血清TNF-α水平在CLP術(shù)后即明顯高于正常對(duì)照組

4、與假手術(shù)組（p<0.01），在24h達(dá)峰值（390.94±27.70 pg/ml），隨后有下降趨勢(shì)，但仍顯著高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組（p<0.01）。3.CLP術(shù)后3h血清E-選擇素水平開始升高（0.26±0.02ng/ml），顯著高于正常對(duì)照組與假手術(shù)組（p<0.05），在24h達(dá)峰值（0.40±0.01ng/ml），隨后有下降趨勢(shì)，但仍高于正常對(duì)照組和假手術(shù)組（p<0.05）。4.肺臟濕重/干重（W/D）值、肺系數(shù)、肺水含量在CLP

5、術(shù)后均明顯高于正常對(duì)照組（p<0.05）和假手術(shù)組（p<0.05），隨時(shí)間推移，比值逐漸上升，且在各時(shí)間點(diǎn)均明顯高于正常對(duì)照組（p<0.01）與假手術(shù)組（p<0.05）。以上指標(biāo)在假手術(shù)組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)均明顯高于正常對(duì)照組（p<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.電鏡下觀察肺臟血管內(nèi)皮細(xì)胞（VEC）和肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞（ATⅡ）在膿毒癥發(fā)展過程中損害逐漸加重，且根據(jù)《黎鰲燒傷學(xué)》血管內(nèi)皮超微結(jié)構(gòu)損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度隨時(shí)間推移分值逐漸增高

6、。ATⅡ正常形態(tài)維持其正常功能，本實(shí)驗(yàn)中ATⅡ正常形態(tài)逐漸破壞。6.肺泡灌洗液巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1α與血清E-選擇素采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析，兩者存在顯著正相關(guān)，F(xiàn)=5.557，P<0.05，相關(guān)系數(shù)為0.407，P<0.01.得回歸方程為：y(MIP-1α)=0.504+1.814x（E-selectin）.
　　 結(jié)論：1.在膿毒癥致急性肺損傷發(fā)病過程中，肺泡巨噬細(xì)胞可能有助于加大肺臟的炎癥損傷，而高炎癥狀態(tài)，可增