氯沙坦通過影響高血壓大鼠心肌成纖維細胞間質(zhì)成分抑制心室重構(gòu).pdf

1、目的：研究氯沙坦通過影響高血壓大鼠心肌成纖維細胞間質(zhì)成分抑制心室重構(gòu)的藥理機制。 方法：采用Sprague-Dawley大鼠建立兩腎一夾型高血壓模型，將大鼠隨機分為對照組、高血壓組和氯沙坦治療組。采用鼠尾動脈測壓法記錄每周血壓變化，實驗?zāi)┓Q體重，處死大鼠切取心臟，并計算心臟與體重比值。免疫組織化學方法測定心臟組織中Ⅲ型膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶-2和JNK1/2表達。培養(yǎng)心肌成纖維細胞，免疫細胞化學法鑒定細胞，MTT法測氯沙坦和Ang

2、Ⅱ?qū)毎鲋郴钚杂绊懙牧啃шP(guān)系，WesternBlotting測AngⅡ刺激成纖維細胞心肌JNK1/2表達的時效關(guān)系。根據(jù)實驗所得AngⅡ刺激心肌成纖維細胞增殖活性作用的EC50值、氯沙坦抑制心肌成纖維細胞活性作用的IC50值和AngⅡ刺激JNK1/2表達的最佳時間，心肌成纖維細胞分為無血清DMEM組、AngⅡ100nM組、AngⅡ100nM+losartan100nM組、losartan100nM組，藥物干預(yù)后分別收集各組蛋白質(zhì)、培養(yǎng)

3、上清液，Westernblotting檢測各組MMP-2、JNK1/2蛋白表達，ELISA檢測分泌至培養(yǎng)上清液中MMP-2的量。 結(jié)果：左腎動脈結(jié)扎術(shù)后大鼠收縮壓升高，心臟體重比值增加，心肌間質(zhì)Ⅲ型膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶-2、心肌細胞JNK1/2表達增多。氯沙坦治療能顯著降低大鼠收縮壓，降低心臟體重比值，并且使心肌間質(zhì)Ⅲ型膠原、基質(zhì)金屬蛋白酶-2、心肌細胞JNK1/2蛋白表達減少。AngⅡ刺激心肌成纖維細胞活性作用的EC50為53

4、nM，氯沙坦抑制心肌成纖維細胞活性作用的IC50為56.3nM。JNK1/2蛋白表達在AngⅡ刺激2min達高峰，隨后表達逐漸降低。AngⅡ增加JNK1/2表達，氯沙坦降低AngⅡ刺激導(dǎo)致的JNK1/2表達。AngⅡ組MMP-2蛋白表達較無血清DMEM組明顯增高，氯沙坦降低AngⅡ刺激增高的MMP-2表達。AngⅡ組MMP-2分泌較無血清DMEM組增高，氯沙坦減少AngⅡ刺激所致MMP-2分泌增高。 結(jié)論：氯沙坦防治高血壓引起的