骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜微粒治療大鼠肺動(dòng)脈高壓的研究.pdf

1、目的：通過(guò)建立肺動(dòng)脈高壓(Pulmonary artery hypertension，PAH)大鼠模型，觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜微粒(Bone marrow mesenchymal stem cells-derived microp-articles，BMSCs-MP)對(duì)PAH的治療作用。
　　 方法：⑴取2周齡清潔級(jí)SD大鼠的骨髓，進(jìn)行骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代分離培養(yǎng)。通過(guò)流式細(xì)胞學(xué)分析其表面標(biāo)記，以及分化功能實(shí)驗(yàn)鑒定其成骨和成脂

2、肪能力。在低營(yíng)養(yǎng)條件下培養(yǎng)MSCs，誘導(dǎo)細(xì)胞釋放MP。將培養(yǎng)上清液超速離心后收獲MP，測(cè)定MP的蛋白濃度，并通過(guò)流式細(xì)胞儀分析其表面標(biāo)志物，以及透射電鏡觀察其結(jié)構(gòu)，對(duì)收獲的MP進(jìn)行鑒定。⑵選健康的SD大鼠隨機(jī)分成四組:正常對(duì)照組（N組）、肺動(dòng)脈高壓不干預(yù)組(PAH組)、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞干預(yù)組(MSC組)以及間充質(zhì)干細(xì)胞膜微粒干預(yù)組(MP組)。PAH模型的構(gòu)建:通過(guò)一次性腹腔注射野百合堿(MCT)50mg/Kg，N組經(jīng)腹腔注射相等體積的生

3、理鹽水。在造模后3周:MSC組通過(guò)尾靜脈一次性注射1×106個(gè)MSCs; MP組通過(guò)尾靜脈注射，30μg/只的MP，隔日注射，持續(xù)2周;N組和PAH組經(jīng)尾靜脈注射同等體積的生理鹽水。2周后，測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組大鼠血流動(dòng)力學(xué)變化、右心室肥厚指數(shù)(RV/LV+S)、肺小動(dòng)脈管壁厚度指數(shù)(TI)，以及肺小動(dòng)脈管腔面積指數(shù)(AI)。
　　 結(jié)果：肺動(dòng)脈高壓組干預(yù)治療2周后，MP組和MSCs組的平均肺動(dòng)脈壓(MPAP)、RV/LV+S、TI、A