肺動脈高壓大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的生物學(xué)功能.pdf

1、目的：
　　通過研究肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs)的增殖、血管形成能力并其探討生物學(xué)特性。為BMSCs移植治療PAH提供初步的實驗依據(jù)。
　　方法：
　　在大鼠腹腔內(nèi)給予10％野百合堿(60mg/kg)注射建立肺動脈高壓模型，按體重注射相應(yīng)體積生理鹽水制作正常組

2、模型;MCT注射3周后同時測定PAH組和正常組大鼠肺血流動力學(xué)參數(shù)（平均肺動脈壓）、測左心室(LV)、室間隔(S)及右心室(RV)質(zhì)量，利用RV/(LV+S)計算得到右心室肥厚指數(shù)RVHI; H.E染色觀察肺小動脈壁結(jié)構(gòu);通過血球自動分析儀測定大鼠靜脈血中的中性粒細胞百分比;密度梯度離心聯(lián)合貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)PAH組和正常組大鼠BMSCs，倒置顯微鏡下觀察并用照相機拍照BMSCs形態(tài);用流式細胞儀儀器檢測細胞多個表面抗原來綜合鑒定BMS

3、Cs，并在體外進行血管形成實驗;CCK-8法測定BMSCs的生長曲線。
　　結(jié)果：
　　1.野百合堿注射3周后，較正常組大鼠，PAH組大鼠mPAP和RVHI明顯升高(P＜0.01)。2.靜脈血分析:與正常組大鼠相比，PAH組大鼠中性粒細胞百分比顯著升高(P＜0.01)。3.H.E染色切片顯示PAH組大鼠肺小動脈管壁較正常組大鼠顯著增厚。4.流式細胞儀儀器檢測大鼠BMSCs表面標(biāo)志:較正常組大鼠，PAH組大鼠BMSCs陽性表面

4、標(biāo)志CD44、CD90表達率顯著減少(P＜0.05)，陰性表面標(biāo)志CD31、CD34、CD45表達率顯著增加（P＜0.05）。5.PAH組大鼠BMSCs較正常組大鼠生長增殖能力均明顯下降。6.血管形成實驗:與正常組大鼠BMSCs比較，PAH組大鼠BMSCs形成血管腔數(shù)顯著減少（P＜0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、通過采用在腹腔內(nèi)注射野百合堿的方法成功制作大鼠肺動脈高壓模型。2、PAH大鼠體內(nèi)存在炎癥。3、采用Ficoll密