組織工程材料KLD-12多肽-TGF-β1納米纖維凝膠復(fù)合BMSCs治療椎間盤(pán)退變效果的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討組織工程材料KLD-12多肽/TGF-β1納米纖維凝膠復(fù)合BMSCs治療椎間盤(pán)退變的效果。
　　方法：選取健康新西蘭大白兔40只，隨機(jī)平均分為A、B、C、D、E五組，其中A、B、C、D四組兔行纖維環(huán)穿刺髓核抽吸法建立兔椎間盤(pán)退變模型（L3-4、L4-5、L5-6），術(shù)后兩周將KLD-12多肽/TGF-β/BMSCs凝膠、生理鹽水、KLD-12多肽/BMSCs凝膠、KLD-12多肽/TGF-β1凝膠40μl分別原位植入退變

2、椎間盤(pán)，E組不做任何處理。移植術(shù)后4周，8周，12周，24周每組隨機(jī)抽取2只兔行X線及MRI影像學(xué)檢查，之后收集兔椎間盤(pán)標(biāo)本經(jīng)行大體觀察、HE染色、半定量 RT-PCR檢測(cè)椎間盤(pán) CollagenⅡ及Aggrecan mRNA表達(dá)，觀察各組之間椎間盤(pán)變化。
　　結(jié)果：X線片檢查，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)％ DHI與A組相比：B、C、D組4周、8周、12周、24周均降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。MRI檢查T(mén)2加權(quán)信號(hào)強(qiáng)度，與A組相比，

3、C、D組略降低，B組明顯降低，E組明顯最高。與A組相比：B、C、D、E組4周、8周、12周、24周差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。大體標(biāo)本觀察，A組可見(jiàn)新生髓核樣組織；B組中央髓核組織缺失，可見(jiàn)灰黃色的纖維樣增生組織；C組椎間隙稍狹窄，中央髓核區(qū)可見(jiàn)白色纖維樣增生組織，質(zhì)地較韌，外周纖維環(huán)結(jié)構(gòu)稍紊亂；D組可見(jiàn)少量新生髓核樣組織。HE染色，據(jù)椎間盤(pán)退變組織學(xué)分級(jí)：A組1~2級(jí)，B組4~5級(jí)，C組3~4級(jí)，D組2~3級(jí)，E組~0級(jí)。甲苯

4、胺藍(lán)染色，A組髓核組織甲苯胺藍(lán)深度染色，B組髓核組織甲苯胺藍(lán)染色部分髓核組織缺失，不著色，局部淡染；C組和D組髓核組織甲苯胺藍(lán)中度染色；E組：髓核組織甲苯胺藍(lán)深度染色。Aggrecan mRNA，A組~E組均有表達(dá)，A組與分別B、C、D組比較，各個(gè)時(shí)間點(diǎn)表達(dá)顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；A組與E組比較，表達(dá)顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。CollagenⅡmRNA，A組~E組均有表達(dá)，A組與分別B、C、D組